Рисовать миньона по клеточкам: Миньон рисунки по клеточкам

Как нарисовать влюбленного миньона, по клеточкам. | Творчество

Автор TworiSmelo.com На чтение 2 мин. Опубликовано 06.02.2015

Миньоны герои мультфильма “Гадкий Я”, весьма милые и смешные создания. Урок рисования посвящен одному из них, а так как скоро Валентинов день, миньон имеет влюбленный вид и у него есть шарик для вас, хотя логичнее было бы нарисовать ему банан. Вы можете создать своего миньона, после данного урока, будет не трудно нарисовать целую армию миньонов.

По времени, рисование миньона занимает: 20 минут.

Материалы: бумага, ластик, простой и цветные карандаши.

Рисовать миньона не сложно, но небольшие навыки рисования все же необходимы, а если необходим урок попроще, то можно посмотреть  “рисунки из отпечаток рук”.

1. ШАГ

Рисуем овал – очертания туловища, больше похожего на картофилину. Можно отметить нижнюю часть, где у миньона комбинезон находится.

2. ШАГ

Нарисуем глаза миньонов – очки и ремешок, а еще можно подкорректировать туловище, если есть неточности в этом. И отмечаем, где у него улыбка (рот), в соответствии с задуманным образом.

3. ШАГ

Рисуем ноги, ручки, прическу и более детально прорисовываем очки. Одна рука у миньона, в представленном рисунке, вытянута, так как в ней будет воздушный шарик.

 4. ШАГ

Подрисовываем руки, ноги, очки более детально, убирая все неточности. Рисуем все мелкие детали на комбинезоне: кармашка с литерой «G» на чёрном фоне, пуговицы, ремешки. Рисуем шарик и ботинки на ногах. И самое главное, от чего зависит настроение миньона – выражение его глаз, в данном случае оно немного смущенное.

5. ШАГ

Теперь беремся раскрашивать нашего миньона цветными карандашами. Сначала закрашиваем самого миньона в желтый цвет, одежду его голубым штрихуем, а руки и ботинки – черным. Создаем тени для объемности на одежде.

6.ШАГ

И на заключительном этапе, немного штрихуем черным карандашом под глазами – тень от очков, создаем объем. Прическу прорисовываем черным карандашом, делаем шарик поярче и в принципе миньон готов!

Полезное! Хорошо, когда умеешь рисовать, шить и можешь сам создать себе любого мультяшного героя, а для тех кто является поклонником  куклы monster high и не владеет художественными навыками, может заказать готовую куклу.

Вам будет интересно:

Как нарисовать миньона поэтапно

Миньоны очень похожи друг на друга, но между ними есть тонкие различия, высота волос, прическа, количество глаз и т.п.

В этом руководстве мы поэтапно покажем, как нарисовать стандартного миньона, такого как Марк или Дэйв. Вы сможете самостоятельно внести изменения, чтобы нарисовать вашего любимого персонажа.

 

Начинаем с карандашного наброска. Используем легкие карандашные штрихи, не нажимайте слишком сильно.

Этап 1

Начните с круга в верхней части страницы. Он не должен быть безупречным, это просто основа для головы миньона. Если вы хотите нарисовать упитанного персонажа, такого как Джош, то нарисуйте овал или круг пошире.

Этап 2

Затем нарисуйте две пересекающихся линии, вертикальную и горизонтальную. Нижняя часть вертикальной линии должна выступать за пределы круга. Длина вертикальной линии определяет высоту миньона. Если вы хотите нарисовать высокого миньона, такого как Тим, нарисуйте линию побольше. Конечный результат будет выглядеть как крест в круге. Эта конструкция поможет вам нарисовать лицо миньона.

Этап 3

Рисуем два небольших круга в верхней части горизонтальной линии, по одному с каждой стороны от вертикальной линии. Это будут контуры глаз нашего персонажа. Если вы хотите нарисовать одноглазого миньона, как Стюарт, просто нарисуйте большой круг в центре.

Этап 4

Под глазами, нарисуйте контур, похожий на перевернутую английскую букву D, в качестве ориентира для рта миньона. Используйте нижнюю часть основного круга, чтобы правильно расположить эту фигуру.

Этап 5

Под головой, нарисуйте фигуру в форме большой буквы U, в качестве контура для тела фаворита. Концы U должны соприкасаться с концам горизонтальной линии.

Этап 6

По обе стороны от тела, нарисуйте две изогнутых линии, как направляющие для рук фаворита. Линия слева должна указывать вверх по направлению к голове, а другая должна быть направлена вниз вдоль туловища. В качестве рук миньона, нарисуйте маленький круг на конце каждой линии. Короткие линии станут основой для его пальцев.

Этап 7

Под контуром тела миньона, нарисуйте две небольших фигуры, которые похожи на прямоугольники без верхушек. Они станут направляющими для коротких штанишек. Под каждой из фигур, нарисуйте небольшую U-образную дугу в качестве контура его обуви.

Этап 8

Первоначальный эскиз готов. У вас есть основа для рисования симпатичного Миньона. Мы набросали её легкими карандашными штрихами. Теперь хорошенько заточите карандаш, предстоит сильнее давить на него, чтобы получить более темные и четкие линии окончательного рисунка.

Этап 9

Темные круги в центре это глаза Миньона. Два внешних сливающихся круга это его толстые очки. Нарисуйте слева и справа небольшие квадраты, изображающие дужки или ремни от очков. Результат должен выглядеть как на картинке.

Этап 10

В каждом «стеклышке» от очков нарисуйте небольшие окружности, которые станут зрачками. В качестве хрусталиков, внутри этих окружностей будут жирные черные точки. В пространстве между контуром зрачка и хрусталика рисуем малюсенькие кружки – это блики в глазах Миньона. В верхней и нижней части рисуем его веки.

Этап 11

Обводим контур рта, чтобы получить темную четкую линию и рисуем внутри этой фигуры несколько квадратов. Они станут большими зубами нашего персонажа.

Этап 12

Нарисуйте в верхней части головы несколько кривых линий с пробором по середине, используя большой круг с которого все началось, в качестве основы. Это волосы. Вы можете нарисовать волосы по-другому, в зависимости от того какого миньона вы рисуете.

Этап 13

Нарисуйте два вытянутых прямоугольника, повторяющие направление нижней части основного круга. Это наплечные ремни от комбинезона Миньона. В конце каждого прямоугольника изображаем небольшие кружки – это кнопки. Рисуем верхний контур комбинезона внутри U-образной фигуры.

Этап 14

На этом этапе рисуем нижнюю часть комбинезона. Пояс комбинезона находится чуть ниже середины U-образной фигуры. Пересечения поясничной линии комбинезона и ранее нарисованной его передней частью образуют карманы. Внутри передней части рисуем логотип, который представляет собой ромб внутри которого бука G. Заканчиваем комбинезон рисованием брюк, для чего используем маленькие квадраты нарисованные ранее.

Этап 15

Рисуем линию параллельно линии руки нарисованной ранее. Таким образом, рука Миньона стала толще. Использую круг на конце руки, формируем ладонь в перчатке сжатую в кулак.

Этап 16

Нарисуйте правую руку, использую ранее нарисованную линию как направляющую. Её толщина должна быть такой же, как у левой руки. Рисуем ладонь в перчатке, использую круг на конце направляющей линии и короткие отрезки, торчащие из этого круга.

Этап 17

Используйте небольшие U-образные дуги в самом низу, чтобы нарисовать ботинки для Миньона. Параллельная линия вдоль нижней кромки ботинок позволит изобразить толстую подошву.

Этап 18

Мы близки к финалу. Теперь у вас есть отличный эскиз Миньона из мультфильма Гадкий Я. Но ему еще надо придать законченный вид.

Этап 19

Ручкой или маркером еще раз обводим и подчеркиваем контуры рисунка. После того как чернила высохнут, стираем все лишние карандашные линии. Теперь у вас есть готовый персонаж Миньон! Вы можете остановиться на этом или перейти к заключительному этапу.

Этап 20

Для того чтобы полностью закончить рисунок, мы должны его раскрасить. Вы можете использовать все, что угодно: маркеры, цветные карандаши или даже мелки! Цвет кожи Миньона желтый. Ботинки, перчатки и дужки очков черные. Очки серые, а глаза карие. Комбинезон синего цвета.

Это все!

Для того чтобы вам не отвлекаться на монитор при поэтапном рисовании Миньона, мы подготовили этот файл. Вы можете распечатать его на принтере.

Как рисовать миньона по шагам для начинающих • Makusha

Поскольку я никогда еще не готовил ни одного урока про этих желтых помощников доктора Грю из мультфильма “Гадкий я”, который вот-вот уже будет идти в кинозалах в продолжении, то сегодня именно этих смешных миньонов и порисуем.

Этот смешной и удивительный миньон один из самых ярких из якобы злых героев мультика, которых я когда-либо видел. Я знаю, что должен был бы подготовить урок намного раньше и идея урока постоянно зудела во мне и не давала покоя. Но это совершенно вылетало из головы, как только доходило до дела. У меня в голове и сейчас их смешные голоса и их смешное “Нет, нет, нет. Папой. Папой!”. Я даже нашел их выражения на их же смешном языке! Может тоже попробовать

Они милые, смешные и запоминающиеся, поэтому я надеюсь, что вы весело порисуете вместе со мной одного из миньонов Грю. Удачи всем!

Как рисовать миньона по шагам для начинающих

Шаг 1.

Напомню, что совсем недавно мы рисовали Майка Вазовски и он у нас здорово получился. Я просто хочу выделить его из множества мультфильмов, по которым мы учились рисовать. И теперь уже сразу начнем миньона.

Начните с рисования круга для головы, затем добавляем другую неровную форму для небольшого тела. На лице линии для пропорций и направления черт лица нашего симпатяги.

Как рисовать миньона по шагам для начинающих

 

Шаг 2.

Теперь вы будете рисовать утолщенные линии, чтобы зарисовать его голову. Добавьте немного веточек для волос и перейдите к шагу три.

Как рисовать миньона по шагам для начинающих

 

Шаг 3.

Отличительная черта этих милых существ униформа и очки. Они бывают одноглазые и двуглазые. Я просто кайфую от одноглазых. Но вашему вниманию даю второй вариант. Нарисуйте для нашего персонажа очки и добавьте рот. Очки крепятся ремнями к голове.

Как рисовать миньона по шагам для начинающих

 

Шаг 4.

Затем, нарисуйте рамки очков, добавьте глаза, включая зрачки.

Как рисовать миньона по шагам для начинающих

 

Шаг 5.

Нарисуем почти все тело, добавим рабочий джинсовый комбинезон, затем добавим еще руки и часть перчаток.

Как рисовать миньона по шагам для начинающих

 

Шаг 6.

Здесь мы закончим рисование рук в виде кулаков. Нарисуйте нижнюю часть комбинезона, затем добавьте деталь на грудь для стиля.

Как рисовать миньона по шагам для начинающих

 

Шаг 7.

Вы должны закончить этот шаг, добавив ноги и обувь. Добавим детали линий для подошв и можете шлифовать рисунок от ошибок.

Как рисовать миньона по шагам для начинающих

 

Шаг 8.

Угадайте в какой цвет его лучше раскрасить?

Банн-нана!

Как рисовать миньона по шагам для начинающих

 

 

И на последок еще пачка миньонов вам для рисунков:

 

Как нарисовать миньона карандашом поэтапно. Учимся как нарисовать миньона поэтапно

Американский рынок мультипликации каждый год дарит своим поклонникам новые, уникальные и интересные картины. Одной из последних работ, вышедших в прокат летом 2015 года, стал мультфильм «Миньоны». Эта одна из немногих картин, кассовые сборы которой превысили 1 млрд. долларов США. Мультфильм рассказывает о маленьких существах, приспешниках злодеев, которые пытаются найти себе новых хозяев. Миньоны, главные герои картины, начинают свои поиски в Нью-Йорке в конце 1960-х годов. Там их ждут невероятные приключения, жизнь, полная опасностей и борьба за справедливое будущее. Посмотрев этот мультфильм, вряд ли найдется малыш, который бы не захотел узнать о том, как нарисовать миньона самостоятельно. Поэтому предлагаем вашему вниманию мастер-классы, которые помогут вам в этом.

Как нарисовать миньона карандашом?

Для начала рекомендуем попробовать свои силы и изобразить веселого Стюарта. На вопрос, как пошагово нарисовать миньона, сразу хочется ответить, что ювелирная точность тут не нужна и здесь вполне допустимы небрежные линии. Поэтому с особой сложностью вы вряд ли столкнетесь при работе над этим персонажем.

Уверены, что теперь для начинающих художников, изучивших наш мастер-класс, нарисовать миньона поэтапно как карандашом, так и мелками или ручкой, будет очень просто.

Как нарисовать миньона-девочку?

А теперь, если вы успешно изобразили Стюарта, предлагаем попробовать нарисовать миньона женского пола. Этот рисунок потребует от юных художников не только терпения и усидчивости, но и некоторых умений в области изобразительного искусства:

Не расстраивайтесь, если нарисовать поэтапно карандашом или ручкой миньона-девочку не получилось сразу, как правило, после нескольких попыток она получается не хуже, чем у художников мультфильма.

Как нарисовать миньона по клеткам?

Бесспорно, изобразить это милое существо на листике с расчерченной клеткой не представляет собой ничего сложного. Пожалуй, это один из самых легких способов нарисовать любимого персонажа. Для работы вам понадобятся цветные карандаши: желтый, черный, серый, коричневый, синий и поле с клеткой по горизонтали 12 штук, а по вертикали 24. Схема выполнения рисунка построена на закрашивании клеток в разные цвета. В результате должен получится вот такой миньон.

Итак, нарисовать поэтапно миньона, как для начинающих, так и для «продвинутых» художников, не представляет особой сложности. В зависимости от того, как вы владеете карандашом, всегда можно подобрать тот вариант, в котором у вас изобразить персонажа мультфильма обязательно получится.

Если вам нравиться этот мультипликационный персонаж, попробуйте или

Статьи по теме:

Сначала кажется, что из арбуза не придумать никакой озорной и веселой поделки. Но многие так не считают. И в подтверждение этому предлагаем вашему вниманию мастер-класс, а также несколько фото-идей в продолжение темы.	Загадочные существа — драконы. Мифические ли это животные, или были они на самом деле? Дискуссии ведутся и сегодня. Но интерес не пропадал никогда, да и не только среди взрослых, — дети также обожают их. Каждом ребенку будет интересно попробовать нарисовать их.

В этом уроке вы узнаете, как нарисовать обычного миньона карандашом. Как мы знаем, все миньоны похожи друг на друга. Тем не менее, у них есть отличия, такие как высота, количество глаз, волосы и т.д. Когда-то мы уже , а сегодня нарисуем двуглазого. В этом уроке мы нарисуем классический вариант миньона с двумя глазами. Такими являются Марк и Дейв из мультфильма «Гадкий Я».

Приступаем к уроку.

Шаг 1. Нарисуем круг-голову миньона в верхней части листа. Стоит обратить внимание, что на первых этапах рисования на карандаш нужно нажимать легонько, так как сначала мы делаем черновой набросок, который мы в последствии будем стирать.

Шаг 2. Теперь рисуем перекрестные линии. Вертикальная линия будет определять рост миньона. Горизонтальная линия в последствии поможет правильно расположить черты лица.

Шаг 3. Внутри области головы нарисуем два круга. Их центры должны располагаться чуть выше горизонтальной линии.

Шаг 4. Рисуем карандашом D-образную форму рта миньона. Дуга рта касается нижней части круга.

Шаг 5. Нарисуем тело миньона. Для этого проводим карандашом U-образную линию, концы которой соединяются с головой.

Шаг 6. С левой стороны рисунка нарисуем изогнутую линию руки вверх. А с правой стороны нарисуем изогнутую линию вниз. На концах этих линий изобразим по маленькому кружочку, указывающих на кисти рук. На левом круге покажем три отрезка для пальцев, поднятых вверх.

Шаг 7. Внизу рисуем маленькие ножки миньона. Сначала добавляем U-образные линии для брюк, а под ними такие же формы, но чуть поменьше.

Шаг 8. Предварительный этап завершен. Теперь берем карандаш и чуть жирнее выделяем основной контур. Сейчас у вас рисунок должен быть похож на такой, если вы все рисовали правильно.

Шаг 9. Теперь нарисуем миньону очки. Обведем круги в области глаз. Вокруг этих кругов проведем еще один охватывающий контур. Это придаст толщины очкам. По краям добавим трапецевидные формы, которые будут ремнями для крепления очков.

Шаг 10. Внутри очков рисуем глаза. Добавим радужную оболочку и зрачки. Затем в радужной оболочке нарисуем маленький кружок, который является бликом. Сверху и снизу глаз изобразим небольшие дуги.

Шаг 11. Добавим в рот миньона зубов. Для этого нарисуем закругленные квадратные формы в верхней части рта.

Шаг 12. Теперь нарисуем волосы миньону. В верхней части головы добавляем несколько дуговых линий. В принципе волосы можете нарисовать на свое усмотрение, все зависит от того, какого конкретно миньона вы рисуете из мультфильма «Гадкий Я».

Шаг 13. Переходим к рисованию комбинезона. Для начала нарисуем лямки. В области плеч добавляем удлиненные прямоугольники, которые направлены внутрь рисунка. На концах прямоугольников рисуем маленькие кружочки – пуговички. Далее рисуем сам комбинезон. Для этого проводим П-образную линию, которая снизу закругляется и уходит за спину миньона.

Шаг 14. В центре комбинезона рисуем нашивку с логотипом. Логотип состоит из буквы «G», которая напоминает по форме алмаз. Внизу комбинезона дорисовываем брюки.

Шаг 15. Переходим к рукам. Добавляем толщины руке с правой стороны, для этого нарисуем дополнительные две линии. На конце руки рисуем перчатку, за ее основу берем круг. Рука зажата в кулак.

Шаг 16. По примеру предыдущего шага, рисуем левую руку. Сначала добавляем дополнительные линии, которые придадут ей толщины, а затем рисуем перчатку. Не забываем про растопыренные пальцы.

Шаг 17. Рисуем на ногах ботинки. Чуть ниже на ботинках добавляем еще линии, чтобы получились подошвы.

Шаг 18. Вот наш грубый эскиз нарисован. Конечно, рисунок еще не выглядит завершенным, поэтому мы продолжаем.

Шаг 19. Теперь основной конур обводим жирно карандашом. А лучше для этого взять ручку или фломастер, если рисунок получился большой, то подойдет даже маркер. Как только обвели контур, подождите немного, чтобы чернила высохли. После этого стирайте все лишние линии от карандаша. Если же вы изначально обводили рисунок карандашом. То стирайте черновой эскиз аккуратно, чтобы не стереть полностью основные контуры.

Если все сделано правильно, то в итоге должно получиться вот так.

Чтобы уж совсем закончить рисунок, раскрасим его. Само тело миньона раскрашиваем в желтый цвет. Комбинезон будет синий, ботинки, перчатки и крепление очков делаем черными. Очки раскрашиваем серым цветом. Глаза пусть будут коричневые.

Вот так по шагам мы и нарисовали миньона карандашом. Это оказалось не сложно, главное все делать основательно. Для закрепления материала посмотрите этот же урок в видео-формате. Здесь все доступно показано, как правильно нарисовать миньона карандашом с учетом всех этапов, что мы показали выше.

По прохождению урока напишите в комментариях, какой у вас получился миньон.

В статье даны подробные описания, как рисовать миньона.

Очаровательные миньончики, на первый взгляд, все одинаковые. Но среди них есть мальчики и девочки, длинные и короткие миньоны, с двумя глазами или с одним. А еще есть миньоны-злюки.

Миньоны стали любимыми персонажами многих детей

Забавные персонажи проявляют немыслимую для таких маленьких созданий храбрость и решительность, составляя армию помощников главного героя мультфильма. Они немного глуповаты, но такие милашки!

Из этой статьи вы узнаете, как рисовать полюбившихся многим героев популярного полнометражного мультфильма «Гадкий Я» — миньонов. Рисунок займет у вас не более 15-20 минут, если приготовить все необходимое и не отвлекаться по мелочам.

Как нарисовать миньона карандашом поэтапно для начинающих?

Нарисовать одного из миньонов не сложно, если следовать поэтапным описаниям, представленным ниже.

Начнем с классического варианта миньона: коротышки с двумя глазами. Подготовим чистый лист бумаги, простой карандаш и ластик. Наметим границы рисунка, в которых будем рисовать. Это поможет нам вписать миньона в лист бумаги, «не выезжая» за его пределы.

Будем рисовать вот этого миньона

• Голова миньона — это круг. Нарисуем его в верхней половине листа. Важно, чтобы первые штрихи были нарисованы тонкими линиями, без сильного нажатия на карандаш. Ведь это черновой набросок. Линии можно стереть позже резинкой, не оставляя следов. Тогда готовая работа будет выглядеть аккуратно.
• Внутри круга нарисуем перекрестные линии. Протянем вертикальную прямую вниз во весь рост будущего миньона. На горизонтальную линию будем ориентироваться, располагая черты лица.

Нарисуем круг

• Внутри круга по обе стороны вертикальной линии нарисуем глаза. Это два круга, центры которых размещены выше горизонтальной линии.

Добавим две перекрестные линии

• Рот миньона имеет перевернутую D-образную форму. Нарисуем линию и под ней проведем дугу, которая касается нижней части круга. Соединим линии.
• Туловище миньона — это U-образная линия, расположенная прямо под головой. Нарисуем ее карандашом, соединив концы с кругом-головой.

Нарисуем две окружности — глаза

• Добавим нашему миньону руки. Левую руку нарисуем изогнутой вверх линией, а правую — изогнутой вниз. Кисти рук миньонов — это маленькие кружочки, изображенные на конце каждой линии.
• Левую руку нарисуем с короткими пальцами, поднятыми вверх (тремя короткими штрихами, расположенными на одинаковом расстоянии друг от друга).
• Ножки у миньона маленькие. Снова нарисуем U-образные линии по обе стороны от вертикальной. Это будут брюки нашего персонажа. Присоединяем к ним еще 2 коротенькие U-образные линии, но округлим их немного больше. Это будут ступни.

Добавим рот Дорисуем тело Руки у миньона длинные Нарисуем короткие ноги

• Мы справились с предварительным этапом. Переходим к прорисовке линий и уточнению деталей.
• Тем же карандашом выделим основной контур. Линию проводим жирнее чем в предыдущих этапах. Сверяемся с рисунком ниже. Если все шаги вы нарисовали без ошибок, то ваш миньон должен быть похожим на этого:

• Прорисовываем очки миньона: нарисуем еще по одному кругу внутри на небольшом расстоянии от уже нарисованных.
• По краям нарисованной оправы сверху и снизу нарисуем небольшие дуги. Так мы изобразим толстые линзы на очках миньона.
• Оправа держится за счет крепления: нарисуем по обе стороны две маленькие формы в виде трапеций и поделим их коротким штрихом пополам.
• Нарисуем глазки миньона. Вернее, это всего лишь радужные оболочки и зрачки. В радужке дорисуем маленькие кружочки — блики.
• Во рту миньона несколько больших и неровных зубов. Они расположены в верхней части рта. Рисовать зубы будем в виде закругленных квадратов.

Рисуем очки

Добавим зубы Добавляем прическу

• Украсим лысую голову миньона волосиками. Изобразим несколько дуговых линий, растущих с макушки. Прическу миньону можно изменить в зависимости от того, какого миньона вы решили изобразить.
• Комбинезончик миньона начинаем рисовать с лямок. Там, где предположительно у миньона находятся плечи, нарисуем по одному удлиненному прямоугольнику, направляя их внутрь, к груди. Добавим пуговки по краям лямок.
• Комбинезон — это П-образная линия. Снизу закруглим ее края и уведем за спину.
• Дорисовываем нашивку с логотипом в центре комбинезона. Это буква «G». Она напоминает форму алмаза. Продолжим комбинезон вниз, изображая брюки.

Дорисовываем комбинезон

Рисуем руки Дорисовываем пальчики

• Теперь будем рисовать руки. Проведем параллельные линии рядом с уже нарисованными изогнутыми. Впишем предварительно нарисованные кружочки в перчатки. Наметим сжатые в кулак пальчики.
• Левую руку изобразим с растопыренными пальчиками.
• Переходим к ногам: нужно нарисовать миньону ботинки. Для этого просто добавим небольшие линии по краю уже нарисованных ступней. Это будут подошвы ботинок.
• До завершения рисунка осталось совсем немного. Потому продолжаем дальше. Начинаем обводить основной контур. Можно сделать это тем же простым карандашом, но прорисовывать линии жирнее. Или использовать для этого ручку, фломастер, маркер, если рисунок большой.
• После того, как обведем контуры, оставим рисунок на несколько минут, чтобы чернила просохли. Очень осторожно сотрем все вспомогательные линии. Главное, не задеть резинкой основные контуры.

Рисуем ноги в ботинках

• Завершенный рисунок разукрасим: тело миньона — желтым цветом, комбинезон — синим, обувь, перчатки, крепления очков — черным, а оправу очков — серым цветами.
• Глаза у миньона карие.

Уточнить подробности можно, посмотрев видео.

Видео: как нарисовать миньона?

Можно нарисовать миньонов-мальчиков и по другому. Подойдет для рисования и ручка, и простой карандаш и фломастер.

• Начнем рисовать контуры миньонов. Это прямоугольники, у которых углы немного закругленные.
• Там, где у миньонов ноги, нарисуем еще по одному узкому прямоугольнику.
• Разделяем наши прямоугольники на две половины, не нажимая сильно на карандаш. Дорисовываем каждому миньончику свисающие вниз руки в перчатках. Добавляем маленькие ножки.
• В верхней половине каждого миньончика рисуем окружности: одноглазому — одну, двуглазому, соответственно, две. Рот рисуем, как половина круга. Одноглазому оставляем рот так, а двуглазому проведем внизу под дугой еще короткую линию.
• Дорисуем волосики миньонам. Это могут быть торчащие волоски или аккуратный чубчик. Прорисуем очки, комбинезоны с маленькими кармашками в области груди.

• Наведем контуры и сотрем вспомогательные линии. Глаза нарисуем со зрачками и бликами. Прорисуем им пальчики.
• Добавляем еще несколько штрихов: короткими линиями на комбинезонах обозначим складки, в окулярах очков внизу проведем дугообразные линии, чтобы показать границы глаз миньонов.
• Разукрашиваем желтым цветом самих миньонов, а комбинезоны — синие. Они же у них джинсовые.

Как нарисовать в клетку миньона легко и просто?

Если ребенку трудно справиться с рисунком веселого персонажа из мультика, то предложите ему нарисовать миньона по клеточкам.

Можно даже самостоятельно придумать схемы. С такой задачей малыш быстро справиться. К тому же, по клеточкам рисовать и проще, и полезнее. Итак, как же рисовать по клеточкам?

• подготовить тетрадный лист в клетку
• найти подходящую и несложную схему миньона
• разбить работу на несколько шагов и посчитать клетки по горизонтали и по вертикали, чтоб миньон вместился на лист
• внимательно смотреть на образец и закрашивать клетки нужным цветом
• можно рисовать миньона сверху вниз, а можно — наоборот (в зависимости от схемы)

Схемы рисунков миньонов

Видео: как нарисовать миньона по клеточкам

Как нарисовать девочку миньона?

С мальчиками-миньонами мы разобрались. А как нарисовать девочку? Следуйте поэтапному описанию. У нас должна получиться веселая одноглазая девочка-миньон.

• Делаем предварительную разметку, намечаем, как мы впишем миньона-девочку на лист. Все, как в предыдущем варианте.
• Нарисуем круг для глаза. Проведем параллельно еще один кружок, обозначив оправу.
• Крепления очков — это две резиночки с каждой стороны. Нарисуем сначала по две короткие линии с небольшим наклоном вниз, а потом добавим параллельные линии.

Рисуем половину головы Рисуем платье

• Руки девочки-миньона рисуются по тому же принципу, что и руки мальчика.
• Оденем девочку в платьице: начнем с лямок (вспомните, как мы рисовали комбинезон). Вместо пуговок на лямках нарисуем ромашки.
• Под лямками проведем прямую линию и сразу же добавим рядом еще одну — параллельную. На подоле платья нарисуем волнистую линию — кантик.

Рисуем зрачок и прическу

• Нарисуем радужку глаза и зрачок. С прической нужно определиться заранее: будет это хвостик, или косички, или пышные локоны. У настоящей миньона-девочки хвостики. Потому мы остановимся на этой прическе.
• Дорисуем маленький рот. Девочка будет улыбаться, потому у нее видны три зуба.
• Вытираем все вспомогательные линии и разукрашиваем рисунок. Платье сделаем зеленым в белый горошек. Волосики — рыжие.

Миньоны представляют собой героев целой серии популярных современных мультфильмов. Известностью они обязаны не только своей запоминающейся внешности, но и веселому и жизнерадостному характеру. Особенно миньоны нравятся детям, что, впрочем, совсем не удивительно, ведь они являются основной аудиторией подобных мультфильмов. Стоит отметить, что понять, как нарисовать миньона способны даже маленькие дети, особенно в том случае, если им помогут усвоить этот урок их родители.
Перед тем как перейти к изучению того, как нарисовать миньона поэтапно, стоит приготовить все те предметы, которые неизбежно потребуются в процессе работы над изображением этого жизнерадостного желтого существа:
1). Карандаши ярких и насыщенных оттенков;
2). Ручку, имеющую гелевые чернила черного тона;
3). Карандаш, который может быть как самым обычным остро заточенным, так и механическим;
4). Ластик;
5). Листик белой бумаги.

Если все из перечисленных чуть выше предметов есть у вас поблизости, то вы можете приступить к работе:
1. Понять, как нарисовать миньона карандашом поэтапно будет совсем не трудно, если свести все формы к самым простым. Так, тело миньона сильно напоминает яйцо от киндер-сюрприза или же пилюлю. Это вам и следует сперва изобразить;
2. Внизу пририсуйте короткие ножки и ботиночки. Сильно вырисовывать ботинки в данном случае не стоит, так как их все равно скроет юбка;
3. Изобразите юбочку, состоящую из листиков, прикрепленных к поясу;
4. Нарисуйте верхнюю часть купальника, которая сделана из двух половинок кокоса;
5. Изобразите руки танцующего миньона;
6. Чуть выше купальника нарисуйте улыбающийся рот. Затем легкими линиями наметьте расположение очков и глаз. Глаза прорисуйте более детально, изобразив веки и зрачки;
7. Чтобы миньон поэтапно нарисованный выглядел еще более симпатично, на его голове нарисуйте венок из цветочков и листиков. Прорисуйте оправу очков и резинку, которая удерживает их;
8. Зная, как нарисовать миньона карандашом, нужно обвести набросок ручкой и стереть ластиком все ненужное;
9. Очки раскрасьте серыми тонами, а глаза – черным и коричневым;
10. Карандашами черных, коричневых и серых оттенков закрасьте мелкие детали;
11. Самого миньона заштрихуйте желтым и местами красно-коричневым цветом;
12. Раскрасьте юбочку зеленым, песок – светло-коричневым, а венок – различными яркими оттенками карандашей.
Рисунок миньона готов! Теперь, зная, как нарисовать миньона, вы сможете его раскрасить не только карандашами, но и своими любимыми красками. К тому же, вы сможете рисовать забавных миньонов вместе со своими детьми!

Кто хочет узнать как рисовать Миньона? Да все хотят! Кого не спросишь – все хотят. Прям не знаешь, что и делать. Хотя нет, кажется, я знаю. Возьму картинку с одноглазым и двуглазым киндерсюрпризообразным созданием — Миньоном. С нее и будем срисовывать: Кто еще не в курсе Миньоны это бесформенные существа желтого цвета, неизвестно откуда появившиеся на нашу голову. ВикиПедия пишет, будто их создали искусственно, то есть это роботы, созданные безумным ученым. Не такие как Терминатор, но все же. Они кушают, глушат прохладительные напитки и дрыхнут в рабочее время. Помимо всего прочего обожают шутить и подкалывать друг друга. За что их и любят. Шутят, правда, чисто по-американски. Юмор незамысловатый, обыденный, для людей с двузначным айкю и трехзначной зарплатой. Но без них мультфильм был бы вообще скукой смертной, ибо любоваться на лысого носатого мужика в туфлях, который хочет стыбзить луну не так весело. В целом мультик позитивный, нравится взрослым и детям. По сему дарю вам этот урок, пользуйтесь на здоровье:

Как нарисовать Миньона карандашом поэтапно

Шаг первый. Для начала сделаем две формы в которые впишем киндер сюрпризы.
Шаг второй. Дорисуем киндерам ручки и ножки, а сверху еще сделаем круги для глаз.
Шаг третий. Сверху на голове изобразим прическу в виде нескольких торчащих волосков. Добавим работягам очки и робу. Не забудьте прорисовать по середине карман.
Шаг четвертый. Поправим контуры более жирной линией, закрасим зрачки, сделаем пальчики на перчатках. У них по 4 пальца, видимо хватает.
Шаг пятый. Удаляем ненужное ластиком. Аккуратно обводим все цело, добавляем штриховки и вот — поздравляю, вы нарисовать Миньонов:
У Вас получилось? Показывайте своих миньончиков ниже под этой статьей, и не забывайте писать комментарии! Рекомендую попробовать еще таких мультяшных героев.

Как нарисовать миньона — этапы рисования

Как нарисовать миньона поэтапно? Такой способ рисования подойдет как неопытным новичкам, так и опытным художникам. Сам рисунок довольно простой, но очень яркий и красивый.

Миньоны – маленькие желтые человечки из фильма «Гадкий Я». С момента выхода мультфильма у них появилось множество поклонников. Эти человечки очень милые и вариантов их изображения множество. Есть миньоны-мальчики и персонажи-девочки, с длинными волосами и несколькими волосинками на голове, улыбающиеся и грустные. Любят их и взрослые, и дети, и каждый из поклонников мультфильма хочет узнать, как нарисовать миньона легко и просто.

Как нарисовать миньона поэтапно: начинаем с эскиза головы

Начнем пошагово рисовать голову миньона. Для этого в верхней части листика изобразим ровный круг. Это – первый черновой набросок, поэтому давим на карандаш минимально, так, чтобы контур был еле виден и его можно было просто стереть, не оставив заметных следов. Проводим горизонтальную линию через центр круга до его краев и вертикальную, длиной примерно равную радиусу головы. Эти направляющие помогут вам изобразить правильные пропорции лица и тела персонажа. Можно нарисовать миньона по клеточкам. В таком случае не придется чертить ведущие полоски. Чуть выше горизонтальной направляющей, по обе стороны от вертикальной ставим точки. Они должны находиться ровно посередине между краем головы и центральной линией. Это обозначение центров будущих глаз. Обведите кругами одинакового радиуса эти точки. Можно нарисовать одноглазого миньона. Это тоже легко и просто. Вместо двух точек ставим одну, чуть выше центра и рисуем большой глаз. Обозначьте эскиз рта в виде полукруга. Нижняя его часть должна соприкасаться с нижней частью головы.

Как нарисовать миньона легко и просто: делаем набросок тела

Изобразите тело героя мультфильма. Проведите линии от краев головы, чуть ниже средней направляющей, до нижнего отрезка, а снизу проведите горизонтальную полоску. Скруглите углы. Левая рука путь будет поднята. На этом этапе изобразите ее линией с кружком на конце и тремя отрезками – будущими пальцами. Правая рука будет опущена, ее рисуем так же, но направленной вниз и без пальцев.Нижние конечности у мультяшки маленькие, поэтому нарисуйте под телом прямоугольники, размером примерно с кисть, а под ними чуть меньшего размера полуовалы. Подготовка завершена. Выделите внешнюю поверхность тела миньона карандашом. Внутренние направляющие пока не трогайте. Первый этап поэтапного рисования миньона карандашом закончен.

Дорабатываем лицо миньона

Начинаем прорабатывать лицо. Сначала рисуем самую заметную часть – очки. Нарисуйте 2 круга вокруг глаз и обведите их контуром в виде восьмерки, чтобы получилась оправа. По краям добавьте маленькие трапеции, чтобы обозначить дужки очков. Если вы рисовали один глаз, очки рисуйте под них – на все лицо с одним стеклом. Начинаем рисовать глаза внутри очков. В центре, на месте точек, рисуем темные маленькие кружки – зрачки. Чуть побольше кружки – радужная оболочка, в которой тонким контуром нужно обвести небольшой овал – блик. Параллельно очкам подрисуйте небольшие дуги – веки. Чтобы нарисовать милого миньона, изменяйте форму век.Зубы у миньона крупные. Нарисуйте их только в верхней части рта. Для большей естественности они должны быть немного разной формы и размеров. Волосы у каждого персонажа разные. Нарисуйте их длинными штрихами, или короткими, в зависимости от персонажа, а можете вообще их не изображать, заменив на рабочую каску. Теперь можно подкорректировать и форму тела – проведите линию от дужки очков к телу, потому что у миньона нет четкого перехода от головы к шее и телу.

Прорисовываем одежду и туловище персонажа

Рисуем комбинезон миньона карандашом. Для этого изобразите лямки – прямоугольники, идущие от условных плеч наискосок виз. Заканчиваться они должны на расстоянии уголков рта. Внутри концов лямок нарисуйте пуговички-кружочки. Сам комбинезон рисуйте, проведя горизонтальную линию чуть ниже рта. От нее опустите вертикальные края комбинезона, закругляя их края снизу, уводя их за спину вашего персонажа. В центре одежды нарисуйте нашивку и логотип в виде буквы «G» – алмаза в темном ромбе. Обводим брюки, дорисовываем штаны в виде горизонтальных полосок на уровне пояса. Прорисовываем руки. Сначала придаем объем левой руке и пририсовываем перчатку. Рука сжата в кулак. Край перчатки чуть шире кисти. Правая рука поднята вверх. Также утолщаем ее двумя линиями по бокам и рисуем кисть с растопыренными пальцами в перчатке. Следите за тем, чтобы руки были одинаковой толщины. Один из пальцев противостоит остальным. Нарисуйте ботинки и подошвы на них, удвоив нижний край. На задней поверхности ботинок обозначьте каблуки. Пошаговое рисование миньона почти завершено.

Завершаем образ

Эскиз завершен. Для того, чтобы рисунок получился целостным, обведите контур карандашом, фломастером или цветной ручкой. Когда обводка высохнет, сотрите рабочие линии от карандаша. Если вы решили сделать рисунок черно-белым, нарисованным простым карандашом, стирайте рабочие контуры аккуратно. Для того, чтобы красиво нарисовать миньона, раскрасьте рисунок. Сам миньон желтого цвета. Комбинезон – синий, а ботинки черные. Остальные детали и фон можете раскрасить в любые цвета. Лучше всего раскрашивать фломастерами, потому что в этом случае цвет получится максимально ярким.

Как нарисовать миньона из «Гадкий Я» карандашом поэтапно. Как поэтапно карандашом нарисовать миньона

Американский рынок мультипликации каждый год дарит своим поклонникам новые, уникальные и интересные картины. Одной из последних работ, вышедших в прокат летом 2015 года, стал мультфильм «Миньоны». Эта одна из немногих картин, кассовые сборы которой превысили 1 млрд. долларов США. Мультфильм рассказывает о маленьких существах, приспешниках злодеев, которые пытаются найти себе новых хозяев. Миньоны, главные герои картины, начинают свои поиски в Нью-Йорке в конце 1960-х годов. Там их ждут невероятные приключения, жизнь, полная опасностей и борьба за справедливое будущее. Посмотрев этот мультфильм, вряд ли найдется малыш, который бы не захотел узнать о том, как нарисовать миньона самостоятельно. Поэтому предлагаем вашему вниманию мастер-классы, которые помогут вам в этом.

Как нарисовать миньона карандашом?

Для начала рекомендуем попробовать свои силы и изобразить веселого Стюарта. На вопрос, как пошагово нарисовать миньона, сразу хочется ответить, что ювелирная точность тут не нужна и здесь вполне допустимы небрежные линии. Поэтому с особой сложностью вы вряд ли столкнетесь при работе над этим персонажем.

Уверены, что теперь для начинающих художников, изучивших наш мастер-класс, нарисовать миньона поэтапно как карандашом, так и мелками или ручкой, будет очень просто.

Как нарисовать миньона-девочку?

А теперь, если вы успешно изобразили Стюарта, предлагаем попробовать нарисовать миньона женского пола. Этот рисунок потребует от юных художников не только терпения и усидчивости, но и некоторых умений в области изобразительного искусства:

Не расстраивайтесь, если нарисовать поэтапно карандашом или ручкой миньона-девочку не получилось сразу, как правило, после нескольких попыток она получается не хуже, чем у художников мультфильма.

Как нарисовать миньона по клеткам?

Бесспорно, изобразить это милое существо на листике с расчерченной клеткой не представляет собой ничего сложного. Пожалуй, это один из самых легких способов нарисовать любимого персонажа. Для работы вам понадобятся цветные карандаши: желтый, черный, серый, коричневый, синий и поле с клеткой по горизонтали 12 штук, а по вертикали 24. Схема выполнения рисунка построена на закрашивании клеток в разные цвета. В результате должен получится вот такой миньон.

Вы хотите нарисовать миньона? Это же очень просто. Тем более если есть конкретный миньон, которого вы хотите нарисовать. Рисовать можно любым способом: карандашом, ручкой, фломастером или обычными акварельными красками. Но в данной статье я расскажу вам, как нарисовать миньона с помощью обычного карандаша, а затем вы можете включить фантазию и разукрасить его в любые цвета.

Давайте рассмотрим один из вариантов.

Миньоны-мальчики

Шаг первый. Для начала нарисуем два прямоугольника, любого размера с закругленными углами.

Шаг второй. Тонкими штрихами, чтобы с легкостью потом убрать ластиком, разделяем по горизонтали наши формы на две равные части и от уровня линии, по направлению вниз рисуем ручки, а внизу ножки.

Шаг третий. Выше уровня линии рисуем миньонам круги для глаз и немного ниже аккуратно дорисовываем рот.

Шаг четвертый. Сверху на голове изобразим прическу. Тут можно пофантазировать: сделать или несколько торчащих волосков, или один небольшой пучок волос. Затем добавляем очки, рабочий комбинезон и не забываем прорисовать посередине кармашек.

Шаг пятый. Выводим контуры более жирной линией, рисуем зрачки и делаем пальчики на перчатках. Интересно, у них всего по 4 пальца!

Шаг шестой. Убираем лишнее ластиком. Аккуратно обводим, добавляем штрихи и поздравляю, вы нарисовали миньонов!

Шаг седьмой. В самом конце вы можете разукрасить ваш рисунок, как вам нравится. Чаще всего используют желтый и синий цвета: желтый — для тела миньона, а синий – для комбинезона. Глаза оставляйте не закрашенными.

Как нарисовать миньона девочку?

Естественно возникает вопрос: а как нарисовать Миньона-девочку? Рассмотрим поэтапно.

Первые три шага мы делаем как в предыдущем варианте.

Шаг четвертый. В данном варианте мы первым делом пририсовываем круг для глаза и вокруг него рисуем очки.

Шаг шестой. Рисуем зрачок и прическу: это может быть хвостики, косички, но в данном варианте будем использовать именно хвостики. Мы же хотим получить настоящую миньона-девочку?

Шаг седьмой. Добавляем аккуратный улыбающийся рот и убираем все лишнее ластиком.

Шаг восьмой. Раскрасьте своего миньона любым способом. В оригинале у Миньона-девочки зеленое платье в белый горошек, рыжие волосы и черные перчатки на руках, но этот элемент не обязателен.

В видео ниже показывается, как с легкостью можно проделать все данные шаги.

Попытки нарисовать героев мультфильмов не всегда завершаются успешно. Конечно, у большинства нет возможности обращаться к учителю изобразительного искусства в любое время и с любым вопросом — например, как нарисовать миньона. Но сделать рисунок более удачным можно, воспользовавшись простыми и, что важно, проиллюстрированными объяснениями.

Миньоны — достаточно известные в последнее время сказочные персонажи. Ведь на экраны один за другим выходят многочисленные мультфильмы об их приключениях. Человеку без художественного образования изобразить миньона на бумаге не так уж сложно, как может показаться на первый взгляд. По сути, фигурка героя состоит из геометрических фигур, которые просто следует правильно соединить.

Упрощает задачу…простой карандаш

Чтобы незаметно исправлять ошибочные штрихи рисунка, необходимо на первом этапе сделать набросок. Когда он будет готов, останется только навести удачные линии и раскрасить свое произведение. Итак, давайте узнаем, как нарисовать миньона поэтапно карандашом.

• Чуть выше центра альбомного листа вы должны изобразить круг. Не пытайтесь сделать его идеальным: это всего лишь основа для головы персонажа. Если хочется, чтобы миньон выглядел полненьким, нарисуйте более широкий круг или овал.

• В круге сделайте две линии, которые в центре пересекаются. Вертикальная черта должна пересекать пределы будущей головы. Она определяет, насколько высоким будет миньон.

• Нарисуйте два небольших кружочка по обе стороны от вертикальной черты.

• Под кружочками, которые нужны для прорисовывания глаз, изобразите контуры рта в форме кусочка яблока. Полукруг должен касаться нижней части основного круга.

• Внизу к голове присоедините дугу U — это тельце фаворита.

• Справа и слева от тельца нарисуйте две изогнутые линии с кружочками на кончиках. Первая линия должна быть поднята вверх, а вторая — опущена вдоль туловища. Маленький кружок на верхушке первой линии дополните тремя «лучиками».

• Снизу фигурки расположите два небольших прямоугольника. Их верхушка — часть контура тела персонажа. Под прямоугольниками разместите две U-образные дуги. Как видите, штанишки и обувь почти готовы.

• Обведите глазницы сказочного существа четкой двойной линией, чтобы получились очки.

• За «стеклами» очков нарисуйте крохотные окружности с черными точечками по центру — глаза. Сверху и снизу от очертаний очков изобразите веки.

• Обведите рот и к прямой линии дорисуйте крупные квадратики. Они станут зубками героя.

• К основному кругу добавьте волосы — кривые черточки с пробором посередине.

• Начертите два узких прямоугольника чуть ниже очертаний головы с обеих сторон туловища. Ближе к уголкам фигурок поместите небольшие кружки. К полученным ремешкам прибавьте контур комбинезона — и миньон одет.

• В поясничной области туловища присоедините к одежде две линии так, чтобы на наряде появились карманы. В центре комбинезона нарисуйте ромбик — с узорчиком или пустой.

• С помощью параллельных линий сделайте руки толще. Правая ладонь раскрыта, а левая — сжата.

• Небольшие дужки в самом низу — это ботинки. Линия вдоль очертаний обуви снизу будет выглядеть как подошва.

• С помощью фломастера старательно обведите контуры рисунка. Через некоторое время сотрите лишние следы карандаша — и задача выполнена!

Листочек в клеточку — секрет начинающих художников

Многие считают, что легче всего рисовать на разлинованной бумаге. Правда ли это, может собственноручно проверить любой человек, который интересуется, как нарисовать миньона по клеточкам. Для начала приготовьте желтый, черный, коричневый, серый и синий карандаши. Затем возьмите расчерченный лист — по горизонтали 12 клеточек, по вертикали — 24. Окрасьте согласно схеме клеточки в разные цвета — и персонаж перед вами.

Как рисовать желтых фавориток?

Многим юным поклонникам этих персонажей наверняка хотелось бы знать, как нарисовать миньона девочку. Научившись изображать не только обычного фаворита, но и его подружку, можно создать рисунок мультипликационной парочки.

• Ближе к верху дуги нарисуйте круг, а внутри него — еще одну такую же фигуру. К кружкам присоедините дужки очков.

• В серединке очков изобразите глазик, на макушке — волосы, а вдоль туловища — ручки.

• Волосы дополните двумя хвостиками, в нижней части головы начертите изогнутый в улыбке ротик с зубками. Внизу сарафанчика с помощью параллельных линий прорисуйте ножки.

Читайте также:

Двух-трех попыток вполне достаточно, чтобы фаворитка получилась у обычного человека ненамного хуже, чем у художников, работающих над мультфильмом.

Что делать, если миньона зовут Боб?

Требовательных любителей мультипликации может не устроить картинка, на которой изображен «первый попавшийся» миньон. У многих есть свои любимчики, и в таком случае юным художникам хотелось бы выяснить, как создать портрет конкретного персонажа. Наверняка кого-то может особенно интересовать, как нарисовать миньона Боба. Маленький фаворит с таким именем — не самый сложный объект для изображения. Предлагаем убедиться в этом на практике. Вооружитесь карандашиком и приступайте к выполнению инструкции.

• Изобразите овал, немного наклоненный влево. Вдоль него начертите вертикальную линию, а сверху пересеките ее горизонтальной.

• Умения рисовать круги достаточно для того, чтобы нарисовать линзы и очертания глаз персонажа.

• Внутри линз поместите глазки, а кривая линия снизу заменит улыбку.
• Две дужки по бокам туловища — это руки, спрятанные за спиной. К тельцу присоедините ножки и ступни.

• Простые линии разной формы помогут нарисовать комбинезон с кармашками.

• Главные линии наведите, а ненужные удалите ластиком — и Боба уже можно раскрашивать.

Пришло вдохновение и хочется взять карандаш и нарисовать понравившегося персонажа? Но часто наши ожидания не совпадают с реальностью и рисунок получается непохожим на оригинал. Вся проблема в том, что Вы можете не знать, с чего стоит начинать рисовать, не разбираете все «на запчасти». Но мы поможем Вам понять, с чего стоит начинать рисовать, и как сделать Ваш рисунок максимально похожим на оригинал. Итак, рассмотрим, как нарисовать миньона поэтапно.

Что для этого нужно:

• лист бумаги любого формата (рекомендуем начинать с А4 или А5)
• для начала — карандаш H или НВ
• ластик (мягкий)
• карандаш от В до В4 (на Ваш выбор)

Начнем с любого персонажа (ведь, все миньоны имеют похожую форму).

Нарисуйте овал карандашом H или НВ, при этом, загнув линии, как на картинке. Советуем не давить сильно на карандаш, а делать легкие штрихи, которые не трудно будет стереть в случае ошибки.

Затем, рисуя миньона карандашом, для удобства можете разметить ширину его очков и смело их рисовать, добавим так же коротенькие ножки. Не спешите сразу прорисовывать все детали, делайте это постепенно.

Следующим шагом рисуем ручки, что требует большой внимательности. Следите за расстоянием рук от конечной нижней точки туловища до очков – руки находятся буквально между ними. А рисование костюма считается одной из легких частей, ведь там Вы можете подключить и свою фантазию.

На этом этапе мы прорисовываем все окончательные детали: зрачки, ротик, волосы и элементы костюма. Чтобы лучше нарисовать миньона поэтапно карандашом, обратите особое внимание на рисование зрачков.

И вот, Вы уже на финишной прямой и Вам остается только взять карандаш с твердостью от В до В4 (на Ваш выбор) и навести на все контуры миньона, чтобы картинка выглядела более четкой, а лишние линии ‑ стереть. Затушуйте зрачки, чтобы глаза выглядели более живыми. Поздравляем с результатом!

Рассмотрите еще, как нарисовать миньона для начинающих с другим персонажем.

Нарисуйте овал карандашом H или НВ, на этот раз это будет толстенький, но почти ровный овал.

Затем нарисуйте 2 кружочка и 2 кружочка внутри их – это будут очки. Они занимают почти треть всего овала. И нарисуйте маленькие ножки. По соотношению с очками – ножки в вышину получатся меньше.

Следующем шагом — рисование ручек и очертаний предмета (медведя) в них, поэтому прорисуйте их так, как на нашей картинке. А нарисовать комбинезончик не составит никого труда.

На этапе нарисуйте зрачки, пуговицы и кармашки комбинезона, улыбочку и медведя. При рисовании игрушки в руках нашего персонажа, Вы так же можете проявить фантазию и нарисовать там что-угодно.

Рисование миньона поэтапно для начинающих мы закончим тем, что уберем ластиком лишние линии, возьмем карандаш с твердостью от В до В4 (на Ваш выбор) и наведем все контуры миньона, а также распределим тени, где это необходимо (как на картинке) и прорисуем зрачки. Рисунок готов!

Как нарисовать миньона девочку

Этот рисунок немного сложнее, чем прошлые из-за костюма этого персонажа.

Итак, рисуем вытянутый овал карандашом H или НВ. Размечаем конечную точку ножек линией внизу.

Затем рисуем очки (они занимают ¼ всего овала) и примерные очертания головного убора. Напомним: не спешите прорисовывать все мелкие детали сразу.

Следующим шагом рисуем платьице. Оно занимает чуть меньше половины овала.

На этом этапе рисуем ножки, бантик, фартучек и руки. На этот раз нарисовать руки будет не так сложно, ведь они спрятаны за спиной. Не спешите убирать лишние линии ластиком.

Сегодня продолжим уроки пошагового рисования и расскажем о том, как нарисовать миньона карандашом поэтапно для детей по клеткам и в альбоме. Если ваш ребенок любит миньонов и все, что с ними связано, то предложите ему нарисовать его любимых персонажей, думаю, он будет только рад. Ну а как нарисовать миньона карандашом поэтапно вы узнаете из сегодняшней статьи. Помимо наших рисунков в статье добавила несколько пошаговых видео-уроков, посвященных рисованию миньончиков.

Как нарисовать миньона карандашом поэтапно для детей

Нам понадобится:

• простой карандаш
• цветные карандаши
• ластик
• листик для рисования

Как нарисовать миньона:

Вот и все, наш миньон, нарисованный карандашами, готов.

Как нарисовать миньона (видео)

Простые видео-уроки, как нарисовать миньона карандашом поэтапно.

Как нарисовать миньона по клеткам легко

На простом рисовании миньона карандашом мы сегодня не остановились и пошли дальше… Решили нарисовать миньона по клеткам в тетрадке. Поискали подходящие несложные образцы-инструкции о том, как рисовать миньона, вооружились тетрадным листиком, цветными карандашами и… начали рисовать. Ниже мы покажем, что у нас получилось и инструкции-шаблоны, по которым мы рисовали.

Процесс рисования по клеткам несложен, так что малыш с удовольствием будет рисовать своего любимого персонажа. Необходимо просто смотреть на образец-рисунок и закрашивать нужные клеточки в соответствующие образцу цветам.

Нам потребуется:

• Тетрадный лист в клеточку
• Цветные карандаши

Как нарисовать миньона по клеточкам легко:

1. Для начала посчитайте клеточки, чтобы знать, сколько занимает миньон по вертикали и по горизонтали.
2. После того, как убедились, что миньон вместится на тетрадном листике, можно приступать к рисованию.
3. Первого миньончика мы рисовали сверху вниз. Второго миньона нам было удобней рисовать, наоборот, снизу вверх.
4. Ну а вот и сами шаблоны-образцы и наши рисунки миньона по клеткам. Похожи? 🙂

Как нарисовать миньона карандашом поэтапно для детей одноглазого

Нам понадобится:

• простой карандаш
• цветные карандаши
• ластик
• листик для рисования

Как нарисовать миньона:

Нарисуем еще одного миньона — одноглазого. Рисунок очень простой, так что справится ребенок-дошкольник.

Всё миньон, нарисованный карандашом, готов.

Как нарисовать миньона девочку карандашом

Приступим к предпоследнему миньону на сегодня. Это будет одноглазый миньон-девочка. Она будет посложнее предыдущих миньончиков. Но если будете следовать пошаговой фото-инструкции, указанной ниже, то вы и ваш малыш сможете нарисовать миньончика девочку без труда.

Нам потребуется:

• лист бумаги
• простой карандаш
• цветные карандаши
• ластик

Как нарисовать девочку миньона

1. Рисуем очертания головы. По бокам оставляем небольшие отступы — для будущих очков.
2. Рисуем глаз девочке. Для этого необходимо нарисовать два круга и лямки, идущие от них
3. Теперь приступаем к рисованию одежды для миньончика. Рисуем сарафанчик на лямках. И пуговки в виде цветочков.
4. Рисуем ручки в рукавичках, волосы и глазик.
5. Нарисуем улыбающий рот, как и у первого сегодняшнего миньона. Пририсовываем косички, торчащие в разные стороны и выглядывающие из под сарафана ножки в туфельках.
6. Осталось нашу нарисованную девочку-миньона цветными карандашами и рисунок будет готов.

Как нарисовать миньона карандашом пошаговая инструкция

Нам потребуется:

• карандаш простой
• цветные карандаши
• ластик
• лист бумаги

Как нарисовать миньона:

Давайте нарисуем карандашом миньона Стюарта. Ниже дана пошаговая фото-инструкция, следуя которой легко и быстро миньона сможет нарисовать даже дошкольник.

1. С помощью карандаша рисуем круг (голову) и ниже тельце миньона.
2. Рисуем верхнюю часть штанишек и очертания будущих ручек.
3. Изображаем лямки штанишек и нагрудную планку.
4. Пририсовываем миньончику ножки в штанишках и ботиночках.
5. Теперь рисуем очки миньону — изображаем их в виде двух кругов в центре головы и черточки по бокам (дужки)
6. Рисуем волосы.
7. Рисуем глаз, рот и дорисовываем детали комбинезона.
8. Раскрашиваем миньончика цветными карандашами.

Узнаем как правильно нарисовать миньона-девочку: поэтапная инструкция

Миньоны – смешные жизнерадостные существа из популярного мультфильма «Гадкий я». Они очень трогательные, милые и забавные, любят покушать и повеселиться. Сегодня мы посмотрим, как нарисовать миньона-девочку.

Рисуем эскиз

Странные существа очень похожи друг на друга. Однако у каждого из их есть какая-нибудь отличительная черта. Одни имеют единственный глаз, другие — фиолетовые волосы, третьи — вообще лысые. Именно поэтому базовые формы миньонов будут одинаковыми. Начнем с рисования стандартного эскиза. Тело миньона представляет собой вытянутый овал или неправильный прямоугольник без углов. Именно эту фигуру и нужно будет нарисовать. Теперь изобразим очки. Наша девочка будет с одним глазом, значит, и окуляры нужно создать соответствующие. Нарисуйте круг, внутри него еще один, а затем резинку для очков с обеих сторон линзы. Далее отметьте линии глаз – две черточки внутри круга. Затем поставьте жирную точку посредине окуляра. Вот наш глаз готов. Если вы будете внимательны, то быстро разберетесь, как нарисовать миньона-девочку поэтапно. Теперь изобразим руки – по две тонкие линии, исходящие от центра овала. На основании — там, где должны быть руки, — нарисуйте перчатки.

Изображаем платье

Чтобы разобраться, как нарисовать миньона-девочку, рассмотрите картинки, которые можно увидеть здесь же. Наша леди должна иметь красивую одежду и пышную прическу. Платье нарисовать очень просто. Прочертите горизонтальную линию там, где заканчиваются руки, а также еще одну — там, где руки начинаются. Дорисуйте лямки, и прелестный сарафанчик для миньона готов. Осталось украсить его цветочками или горошком. Снизу подрисуйте ступни ног. Теперь наш рисунок почти готов, осталось совсем немного.

Прорисовываем детали

Вы уже поняли, что разобраться в том, как нарисовать миньона-девочку карандашом, вовсе не сложно. Однако наш шедевр требует подготовки. Нам нужно получить красивую прическу. Для этого сначала нарисуем пробор на макушке, проведя несколько скошенных линий. Теперь изобразим веселые косички. Нарисуйте по две тонких линии, торчащих в разные стороны. На кончике каждой косички создайте по пушистой кисточке. Для этого проведите несколько коротких черточек в разные стороны. При желании можно изобразить бантики или веселые резинки. Уже почти понятно, как нарисовать миньона-девочку. Осталось изобразить рот. Для этого в нужном месте нарисуйте две небольшие дуги. Во рту прорисуйте несколько зубов. Таким образом, кажется, что девочка улыбается. Осталось раскрасить нашу модель. Возьмите краски или цветные карандаши. Как правило, миньоны бывают желтого цвета. Их очки – серые, а перчатки и туфли – черного оттенка. Платье может быть любого цвета. Миньоны предпочитают синий оттенок. Не забудьте «оживить» яркими тонами бантики, рот или глаза. Итак, теперь вы знаете, как нарисовать миньона-девочку. Изучив стандартную технику, попробуйте изобразить друзей вашего жизнерадостного существа. Вместе со своим ребенком вы сможете создать целую армию смешных и безобидных малышей.

Как нарисовать миньона · Детские рисунки

Шаг за шагом научитесь рисовать миньона из фильмов «Гадкий я» со всеми его глупыми и нелепыми деталями.

Рисунок миньона, законченный маркером и мелками Промежуток времени урока рисования миньонов

Вместо того, чтобы раскрашивать любимые мультфильмы ваших учеников, почему бы им не сделать свои собственные? Даже очень простые проекты, такие как этот Миньон, дадут им хорошую практику рисования.

И как только ученики почувствуют себя комфортно, нарисовав этого парня, как показано здесь, они смогут сделать больше вариантов с разными позами и делать разные вещи.Каждый художник-мультипликатор с чего-то начинал.

Предварительный просмотр учебника по рисованию миньонов Раскраска миньон Раскраска Раскраска миньон

МАТЕРИАЛЫ

• Нарисуйте миньона (щелкните, чтобы открыть PDF)
• Бумага для рисования
• Черный маркер
• Мелки

НАПРАВЛЕНИЯ

Необходимое время: 1 час.

Как нарисовать миньона

1. Нарисуйте два соприкасающихся круга.

2. Нарисуйте верх туловища.

3. Нарисуйте нижнюю часть тела.

4. Добавьте очки и прическу.

5. Нарисуйте рот и начните комбинезон.

6. Обработайте нагрудник и лямки.

7. Пуск двумя руками.

8. Добавьте перчатки и ноги. Нарисуйте травяной фон.

9. Обведите маркером и цветом.

Более забавные проекты рисования мультфильмов

Как рисовать среди нас Как нарисовать Марио Как нарисовать Капитана Америку Как рисовать чармандера Как рисовать сквиртла

Похожие сообщения

• Как рисовать Эльзу
• Как нарисовать малыша Йоду

Использование мобильных секвенсоров в академическом классе

, ^{1, 2} Класс Колумбийского университета Ubiquitous Genomics 2015 и ^{1, 2, 3, *}

Sophie Заайер

¹ Департамент компьютерных наук, Инженерная школа Fu Foundation, Колумбийский университет, Нью-Йорк, США

² Нью-Йоркский центр генома, Нью-Йорк, США

Янив Эрлих

¹ Департамент наук, Инженерная школа Fu Foundation, Колумбийский университет, Нью-Йорк, США

² Нью-Йоркский центр генома, Нью-Йорк, США

³ Департамент системной биологии, Центр вычислительной биологии и биоинформатики, Колумбийский университет, Нью-Йорк, США

Сара Шейлс, редактор-рецензент

Сара Шейлз, eLife, Соединенное Королевство;

¹ Департамент компьютерных наук, Инженерная школа Fu Foundation, Колумбийский университет, Нью-Йорк, США

² Нью-Йоркский центр генома, Нью-Йорк, США

³ Департамент системной биологии, Центр для вычислительной биологии и биоинформатики, Колумбийский университет, Нью-Йорк, США

Получено 7 января 2016 г .; Принята в печать 6 апреля 2016 г.

Эта статья распространяется в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование и распространение при условии указания автора и источника. Эта статья цитируется в других статьях PMC.

Дополнительные материалы

DOI: 10.7554 / eLife.14258.005

DOI: 10.7554 / eLife.14258.006

DOI: 10.7554 / eLife.14258.007

DOI: 10.7558.004.14258.009

DOI: 10.7554 / eLife.14258.010

DOI: 10.7554 / eLife.14258.011

Abstract

Появление мобильных секвенаторов ДНК сделало возможным генерировать данные секвенирования ДНК вне лабораторий и геномных центров. Здесь мы сообщаем о нашем опыте использования мобильного секвенсора MinION в 13-недельном учебном курсе для студентов и аспирантов. Курс состоял из теоретических занятий, посвященных фундаментальным темам геномики, и нескольких практических занятий на хакатоне.На этих хакатонах студенты использовали секвенсоры MinION для генерации и анализа собственных данных и получения практического опыта по темам, обсуждаемым на теоретических занятиях. В рукописи описывается структура нашего класса, учебный материал и уроки, которые мы извлекли в процессе. Мы надеемся, что представленные здесь знания и материалы предоставят сообществу полезные инструменты, которые помогут обучать будущие поколения ученых-геномистов.

DOI: http: //dx.doi.org / 10.7554 / eLife.14258.001

Исследовательский организм: Человек, Другой

Введение

Последнее десятилетие стало свидетелем драматических изменений в области геномики с появлением технологий высокопроизводительного секвенирования ДНК. Секвенсоры стали идеальным инструментом для широкого спектра приложений, от пренатального генетического скрининга и идентификации микробов до судебной медицины и аутопсий. Таким образом, геномика требует междисциплинарного мышления, которое включает концепции молекулярной биологии, статистики, информатики, а также этические и социальные вопросы.В предыдущей работе подчеркивалась польза от практического обучения, чтобы помочь студентам поместить эти концепции в контекст (Альтман, 1998; Донован, 2008; Рейсдорф и др., 2013; Магана и др., 2014). Практическое обучение также является предпочтительным стилем обучения поколения миллениалов, которое в настоящее время составляет большинство студентов и аспирантов. Исследования показали, что люди этого поколения ориентированы на технологии, наиболее эффективно работают в группах и наиболее эффективно усваивают информацию посредством кинестетического обучения (обучение на практике; Шапиро и др., 2013; Evans et al., 2015; Linderman et al., 2015).

Здесь мы описываем наш опыт использования мобильных секвенаторов ДНК в классе для облегчения практического обучения. Наш класс был посвящен новейшей технологии секвенирования: MinION от Oxford Nanopore Technologies (ONT). В отличие от других технологий секвенирования, которые являются статическими и требуют лабораторных настроек, секвенсор MinION немного больше, чем типичный USB-накопитель, и для его работы требуется только портативный компьютер (; Gardy et al., 2015; McIntyre et al., 2015; Эрлих, 2015).

Класс «Вездесущая геномика».

( A ) Настольный секвенсор Illumina MiSeq (слева) и секвенсор MinION производства Oxford Nanopore Technologies (справа; красный прямоугольник). ( B ) Занятие во время хакатона.

DOI: http://dx.doi.org/10.7554/eLife.14258.002

Обзор класса «Повсеместная геномика»

Мы разработали курс для Колумбийского университета под названием «Повсеместная геномика», который обеспечивает портативное секвенирование в классе.Факультет компьютерных наук предлагал этот курс как факультатив. Из 20 студентов, записавшихся на курс, 50% учились на степень бакалавра, 30% — на степень магистра и 20% были зачислены на программу докторантуры. Большинство (~ 60%) студентов были зачислены на программу информатики, а остальные были зачислены на другие программы, включая электротехнику, науку о гигиене окружающей среды и биомедицинскую информатику. Для этого класса не было никаких предварительных условий, но почти все студенты имели некоторый опыт программирования, и около трети студентов прошли хотя бы один курс по вычислительной биологии.Учащиеся с опытом работы в области вычислительной биологии показали немного лучшие результаты в нашем классе.

Курс состоял из 13 встреч (одно двухчасовое занятие в неделю) и был разделен на теоретическую часть и прикладную часть (дополнительный файл 1). В теоретическом разделе были рассмотрены технологии секвенирования и их потенциальное использование в медицине, бионаблюдении, судебной медицине и этические аспекты секвенирования ДНК, такие как генетическая конфиденциальность и способность участников осознавать риски и потенциальный вред.Целью теоретической секции было создание общей основы для группы студентов с различными специальностями и базовыми знаниями. Формат представлял собой интерактивный семинар, на котором класс обсуждал одну или две недавние исследовательские работы.

Прикладная секция состояла из двух трехнедельных блоков «хакатонов», которые включали секвенирование MinION, анализ данных и задание. По нашим оценкам, расходные материалы на хакатон составят порядка 1000 долларов на команду за выполнение задания (). Однако почти 90% стоимости приходится на секвенсор MinION, и любое снижение его цены повлияет на прогноз затрат.Мы решили использовать термин хакатон, чтобы донести до студентов, что, в отличие от обычной лабораторной работы, вопросы были открытыми, и даже мы (преподаватели) не всегда знали ответы или лучшие инструменты для решения заданий. На первом хакатоне, озаглавленном «От закуски к последовательности», студенты получили немеченую ДНК, собранную из продуктов питания и продуктов из супермаркетов. Им пришлось использовать секвенсоры для сбора данных ДНК и разработать конвейер для определения ингредиентов. На втором хакатоне под названием «CSI Columbia» студенты секвенировали несколько образцов ДНК человека, не зная их идентичности.Хакатон был сосредоточен на сборе данных из этих образцов, и студентам было предложено попробовать любой возможный метод, который они могли себе представить, для генерации следственных выводов.

Таблица 1.

Компания	Продукт	Кат. Номер	Цена за единицу (долл. США)	Количество единиц	Сумма, необходимая для протокола ONT	Стоимость
Covaris	C -ТРУБКА	520079	275 долларов США	10	1	27 долларов США.50
NEB	Модуль для ремонта концов Ultra ™ / хвостовика dA	E7442S	$ 225,00	72 ul	3 мкл	$ 9,40
	5 мл	60 мкл	$ 3,78
Thermo Fisher	Dynabeads MyOne Streptavidin C1	65001	$ 475.00	2 мл	9024 Bluase 2 мл	9024 Bluase Master Mix	M0367S	$ 95	250ul	50 мкл	$ 19
	Пробирки / наконечники для пипеток / H 2 O / этанол и т. 10 $
ONT	Проточная ячейка Набор реагентов		$ 900	1	1	900 долларов США
Прогнозируемые расходы на команду за запуск:						981 доллар США.68

Структура хакатона

Для достижения наших учебных целей мы установили трехнедельный цикл хакатона следующим образом: в первую неделю каждого блока хакатона студенты встречались для ~ 3-часового занятия, в ходе которого они работали в группах, чтобы настроить секвенсор MinION, сгенерировать данные и начать разрабатывать стратегию наилучшего подхода к выполнению задания. На второй неделе у нас была встреча со студентами, чтобы обсудить технические вопросы, связанные с заданием, такие как лучший подход к идентификации организма по данным MinION.Каждая группа должна была изучить свой подход и сообщить о результатах в 5-минутной презентации остальной части класса. В заключительном занятии каждого блока хакатона студенты представили свои результаты и сдали письменные задания (дополнительный файл 1).

Естественно, самыми сложными классами для подготовки были сессии MinION. Мы использовали несколько стратегий, чтобы максимизировать практический опыт студентов в рамках ограниченного времени класса ():

За неделю до хакатона студенты были проинструктированы сформировать группы по 4–5 человек.Мы рекомендовали им формировать группы с различными наборами навыков (например, сочетанием биологических и компьютерных наук).

За несколько дней до хакатонов инструкторы подготовили библиотеки ДНК для класса. Мы решили выполнить эту часть самостоятельно, а не в рамках обучения, поскольку выделение геномной ДНК и подготовка библиотеки ONT занимает ~ 4 часа (дополнительный файл 2). Было нереально включить эти шаги как часть хакатона, учитывая ограничения по времени (хотя это могло измениться с появлением устройства для автоматизированной подготовки библиотек, VolTRAX).

Каждый хакатон начинался с настройки ожиданий студентов; мы напомнили студентам об экспериментальном характере событий. Мы четко сообщили, что им следует предвидеть технические проблемы, и что мы были бы удивлены, если все пойдет гладко. Это помогло уменьшить разочарование студентов, которые привыкли взаимодействовать со зрелыми технологиями в повседневной жизни. Мы продолжили 45-минутной лекцией о целях хакатона и справочных материалах, например, о том, как были подготовлены библиотеки ДНК, особенности интерфейса программного обеспечения MinION и конвейер базовых вызовов (см. Дополнительные файлы 3–6 для заданий и PowerPoint. слайды).

Затем мы попросили студентов попрактиковаться в дозировании. Загрузка реагентов в проточную кювету MinION требует хороших навыков дозирования; в противном случае выход может быть существенно ниже. Поскольку большинство наших студентов никогда раньше не прикасались к пипеткам, мы позволили им попрактиковаться в заливке воды в использованные проточные кюветы MinION до тех пор, пока они не почувствуют себя комфортно при точном дозировании.

Вооруженные протоколом, студенты полностью отвечали за создание данных с минимальной помощью. Они подключили устройства к компьютерам, активировали соответствующие программы, загрузили смесь для заправки (получившую название «топливо») и библиотеки ДНК в проточные кюветы и запустили цикл секвенирования с помощью MinKnow.Как только данные были сгенерированы, они отслеживали ход выполнения цикла секвенирования. После проверки показателей качества секвенсоры были оставлены без присмотра на 48 часов для генерации данных в соответствии с протоколом ONT.

После создания данных мы проинструктировали студентов выполнить задание, которое было разделено на два этапа (дополнительные файлы 5 и 6). Первой вехой был отчет о технических характеристиках секвенатора MinION, таких как общее количество считываний, распределение длин считываний, качество библиотеки ДНК и показатели качества считывания с течением времени.Целью анализа контроля качества было научить студентов подходить к работе с большими наборами геномных данных. Вторая веха была сосредоточена на актуальной научной проблеме (см. Ниже). Для каждого этапа студенты должны были отправить письменный отчет и ссылку на свой код на GitHub (пример: https://github.com/dspeyer/ubiq_genome). Каждый хакатон завершался 10-минутным выступлением каждой группы. Все соответствующие учебные материалы предоставляются в соответствии с международной лицензией Creative Commons Attribution-Share Alike 4.0.

Хакатон, проект 1: закуска к последовательности

Первый хакатон назывался «от закуски к последовательности». Он был вдохновлен несколькими скандалами с едой, такими как конина, обнаруженная в готовых блюдах, которые были помечены как говядина по всей Европе в 2013 году, а также открытие того, что ряд суши-ресторанов в Нью-Йорке утверждали, что продают белого тунца, но на самом деле служили эсколаром. Основываясь на этом вопросе, мы хотели познакомить студентов с определением видов в различных продуктах питания.

Мы подготовили пять библиотек секвенирования из блюд, купленных в местных ресторанах, и сырых продуктов, приобретенных в супермаркете. Библиотеки ДНК представляли собой смесь нескольких ингредиентов (например, сырой говядины и помидоров). Мы решили задать учащимся следующие вопросы: a) Можете ли вы идентифицировать виды в образце пищи с помощью секвенирования MinION без предварительных знаний? б) Можете ли вы количественно определить состав различных ингредиентов? c) Какое минимальное время выполнения секвенирования требуется для обнаружения ингредиентов образца?

После создания данных на хакатонах мы посвятили следующий урок изучению разнообразных алгоритмов секвенирования, которые можно было бы использовать для идентификации видов.Важно отметить, что рабочий процесс определения видов «Что в моем горшке» Oxford Nanopore не поддерживает идентификацию образцов эукариот (Juul et al., 2015), и студентам пришлось искать альтернативы. Студенты этого класса пришли к единому мнению, что инструмент поиска базового локального выравнивания (BLAST) был лучшим вариантом.

Большинство групп смогли идентифицировать виды в чашке. Одно интересное обсуждение возникло в результате двух групп, которые секвенировали образцы, предположительно содержащие говядину.Наибольший успех BLAST был у снежного барана ( Ovis canadensis ), тогда как у одомашненной овцы ( Ovis aries) или коровы ( Bos taurus ) были получены более низкие значения качества выравнивания. Идентификация снежного барана вызвала подозрение, поскольку это животное не является одомашненным. Корова относится к семейству Bovidae , так же как снежный рог и домашние овцы. Студенты рассудили, что образец может быть от члена семьи, и выбрали одомашненную овцу в качестве наиболее вероятного кандидата.Неожиданным открытием стало обнаружение ДНК паразитов Babesia bigemina, Wuchereria bancrofti и Onchocerca ochengi в образцах сырой говядины (по крайней мере, два или более считывания на каждого паразита). Эти результаты вызвали живую дискуссию в классе о безопасности пищевых продуктов. (Примечание: после прочтения предыдущей версии этой рукописи на bioRxiv, Стивен Зальцберг отметил, что последовательности Genbank этих паразитов, вероятно, будут загрязнены ДНК коровы. Таким образом, совпадения BLAST с этими паразитами окончательно не указывают на то, что они присутствовали в образцы продуктов питания.)

В целом этот хакатон был академически подходящим для уровня студентов. Единственная техническая проблема, с которой неоднократно сталкивались студенты, заключалась в том, как выполнить BLAST большое количество последовательностей запросов с помощью интерфейса прикладного программирования (API). Им пришлось найти творческие решения, такие как зеркалирование BLAST Национального института здравоохранения (NIH) на частный сервер и настройка входных параметров, чтобы сделать возможным поиск большого количества длинных считываний MinION.

Хакатон, проект 2: CSI Columbia

На втором хакатоне мы исследовали идентификацию людей с помощью секвенирования генома со сверхнизким охватом с помощью MinION.В судебной медицине идентификация доказательств ДНК основана на анализе 13 хорошо охарактеризованных локусов коротких тандемных повторов (STR) комбинированной системы индекса ДНК (CODIS) (Kayser and de Knijff 2011). Однако теоретический анализ показал, что небольшое количество (30–80) общих однонуклеотидных полиморфизмов, которые наследуются независимо друг от друга, достаточно для положительной идентификации (Lin et al., 2004). Целью этого хакатона было проверить, можно ли использовать эту технику для идентификации людей, использующих секвенирование дробовика MinION с чрезвычайно малым охватом.Мы также призвали студентов протестировать различные методы идентификации человека, такие как изучение митохондриальной гаплогруппы, пола человека и оценка его или ее происхождения. В любом случае наши ожидания были сосредоточены на процессе их научного решения, а не на ответе, и студентов поощряли присылать преподавателям вопросы, когда им требовалась помощь.

Две группы секвенировали библиотеку ДНК, полученную из геномной ДНК от Craig Venter (Levy et al., 2007), одна группа секвенировала образец HapMap из проекта 1000 Genomes Project, а две группы секвенировали геномную ДНК одного из авторов (YE ).Мы выбрали этих людей из-за их общедоступных справочных данных о ДНК. Студенты изначально не знали идентичность секвенированного генома, но на более позднем этапе хакатона мы сказали им, что их образец был либо одним из следующих людей: Крейг Вентер, Джим Уотсон, автор (YE), либо участник. проекта «1000 геномов».

Студенты сочли это задание намного более сложным, чем предыдущее. Из пяти групп одна смогла правильно идентифицировать исходную выборку (Крейг Вентер).Студенты испробовали впечатляющий набор инструментов, но их главной проблемой была обработка данных. Им пришлось преобразовать свои данные в различные форматы, чтобы протестировать различные инструменты, чтобы понять, что инструменты не работают должным образом или плохо документированы, что приводит к потере значительного количества времени. Интересно, что некоторые из студентов позже рассказали нам, что это был первый раз, когда они столкнулись с открытой исследовательской проблемой в реальном мире, и что эта задача дала им лучшее понимание академических исследований.Студенты также предположили, что дополнительные обсуждения между группами во время хакатона могли бы помочь решить некоторые технические проблемы. Это можно сделать с помощью средств онлайн-коммуникации (например, Facebook или веб-сайта Piazza). Будущие инструкторы этого хакатона могут обойти некоторые трудности, ограничив объем анализа. Например, вместо того, чтобы проинструктировать учащихся генерировать любую возможную идентификацию, учащимся можно было бы предложить сосредоточиться только на анализе родословной на основе секвенирования дробовика или отдельных участков последовательности, таких как митохондрии, для более структурированного анализа.

Уроки, извлеченные из проведения хакатонов MinION

Подготовка запасных частей: Мы столкнулись с множеством технических трудностей в 10 запланированных запусках MinION (пять групп за два хакатона). Три проточные кюветы имели недостаточное количество пор (<51), и их пришлось заменить. В другом случае компьютер не смог подключиться к каким-либо приборам MinION, несмотря на работающий порт USB 3.0. Во время хакатона мало времени на устранение неполадок. Поэтому крайне важно предвидеть сценарии отказа и иметь запасные части (т.е. компьютеры, проточные ячейки, топливная смесь и библиотека ДНК).

Рассмотрим резервные данные: В рамках тестирования настроек нашего хакатона мы секвенировали некоторые библиотеки ДНК с помощью MinION перед фактическим событием. Данные, полученные в результате этих тестов, были сохранены, чтобы иметь план действий на случай непредвиденных обстоятельств, если ни один из MinION не сработает во время хакатона. Таким образом, у студентов по-прежнему будут данные для анализа, и продвижение курса не будет поставлено под угрозу. К счастью, нам не пришлось использовать эти данные, но мы призываем организаторов хакатонов MinION рассмотреть этот вариант.

Ожидайте вариабельности в объеме данных: Выход секвенсоров MinION варьировался между запусками. План эксперимента и вопросы, задаваемые во время каждого хакатона, должны быть совместимы как с низким, так и с высоким выходом секвенирования.

Найдите подходящие компьютеры: Одной из наших основных задач было закупить пять компьютеров, соответствующих спецификациям ONT. Наш отдел почти полностью основан на Mac, тогда как текущая спецификация ONT требует компьютер Microsoft Windows.Мы пытались установить виртуальные машины Windows на наши компьютеры Macintosh, но сочли это решение ненадежным, предположительно из-за высокой скорости передачи данных секвенсоров. Компьютеры студентов также не соответствовали техническим требованиям ONT, таким как наличие твердотельного накопителя. Организаторам хакатона MinION следует иметь в виду, что поиск нескольких подходящих компьютеров может потребовать много времени.

Сеть: Последовательность ONT требует подключения к Интернету для базового вызова.Мы подключили пять компьютеров к обычному сетевому концентратору, используя стандартный протокол Ethernet. Проблем не возникло.

Используйте бесплатные инструменты для передачи данных: Последовательность MinION может привести к большим папкам с данными. Мы искали бесплатную программу для автоматической передачи данных через 48 часов после начала цикла с портативного компьютера для секвенирования на компьютеры студентов. Облачные продукты, такие как Dropbox, не поддерживают синхронизацию такого объема данных со своими бесплатными учетными записями.В качестве альтернативы мы использовали бесплатную версию BitTorrent Sync, которая позволяет обмениваться файлами по сети P2P BitTorrrent без ограничения размера. BitTorrent может быть предварительно установлен на рабочей станции и синхронизирован с персональным компьютером учащегося путем обмена ключом для конкретной папки. Это решение для больших файлов может быть настроено за несколько минут и предотвращает технические проблемы.

Анкета

Мы стремились узнать больше о взглядах студентов на геномику и мобильное секвенирование.Мы попросили их ответить на вопросы анкеты перед первым хакатоном, когда студенты познакомились только с теорией секвенирования и ее приложениями, а затем через три недели после завершения первого хакатона.

Хотя размер нашей выборки слишком мал, чтобы делать статистические выводы, мы извлекли уроки из тенденций в ответах. Казалось, что хакатоны сформировали более реалистичное представление о технических проблемах, присущих геномным приложениям. Например, на вопрос «Как вы думаете, сколько времени занимает от подготовки образца до результатов секвенирования с помощью MinION?» Около 70% студентов ответили «за час» (или меньше) до хакатона; но после хакатона только 30% студентов думали, что это займет один час.После хакатонов студенты также подумали, что использование мобильных секвенсоров для отслеживания состояния здоровья широкой публики займет больше времени, и предложили снизить затраты на домашние приложения для секвенирования. Несмотря на то, что этические последствия анализа ДНК довольно подробно обсуждались на протяжении всего курса, мы не заметили изменений во взглядах студентов на некоторые этические вопросы, такие как «Как вы думаете, этично ли секвенировать волосы, найденные на улице?» или «Как вы думаете, секвенирование вашего генома безопасно?» Эти тенденции предполагают, что хакатон в основном сформировал технические знания студентов и продемонстрировал ценность практического опыта как способа помочь им выработать реалистичное представление о проблемах новых технологий.

Заключительные замечания

Мобильное секвенирование в классе оказалось полезным методом обучения студентов междисциплинарной области геномики и контекстуализации геномных концепций. Эти устройства относительно недороги и не требуют сложного оборудования или специального лабораторного помещения для работы. Таким образом, они значительно снижают барьер для интеграции в класс по сравнению с другими технологиями секвенирования.

Основное внимание в этой рукописи уделяется использованию мобильного секвенирования в системе высшего образования (бакалавриат и аспирантура).Несмотря на то, что большинство студентов специализируется на информатике, он может быть подходящим для других специальностей, таких как молекулярная биология и фармацевтика, а также для студентов медицинских вузов. Мы настоятельно рекомендуем инструкторам студентов с ограниченным опытом программирования разрабатывать задания, в которых используются существующие конвейеры анализа данных (например, инструмент ONT «Что в моем горшке»). Также может быть полезно настроить задания для основных студентов. Например, для студентов-биологов задание может быть сосредоточено на таксономии, в то время как студенты-медики могут извлечь выгоду из секвенирования микробов, которые, как известно, вызывают заболевания.Мы также видим потенциал использования этих устройств в учебных планах старших классов STEM и дополнительных программах. Такие занятия могут познакомить учеников на ранних этапах обучения с увлекательным миром ДНК и послужить учебным трамплином для изучения других дисциплин, таких как математика, информатика и химия. Мы надеемся, что ресурсы и опыт, изложенные в этой рукописи, помогут облегчить появление этих программ.

Благодарности

Мы благодарим Джеймса Брейера, Майкла Микореску и Зои МакДугалл из Oxford Nanopore Technologies за техническую поддержку и предоставление реактивов классу.Мы благодарим Стивена Зальцберга за полезные комментарии и обсуждение препринта bioRxiv, а также Джона Кендера и Ронита Закса за то, что они познакомили нас с концепцией особого образования для миллениалов. Мы также благодарим Дину Зелински за полезные комментарии к рукописи. YE имеет награду за карьеру в научном интерфейсе от фонда Burroughs Wellcome Fund. Эта работа была частично поддержана грантом Национального института юстиции (NIJ) 2014-DN-BX-K089 (YE и SZ).

Заявление о финансировании

Спонсоры не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и интерпретации данных или в решении представить работу для публикации.

Информация для авторов

Колумбийский университет Универсальная геномика 2015, класс:

Майя Ананд, Анубха Бхаргава, Энн Бозак, Майкл Карри, Александр Калики, Синьи Ли, Кэти Лин, Майкл Нгуен, Диего Пэрис, Шайенн Пикон Парсли, Шайенн Пикон Парсли Робертс, Дэниел Шпейер, Дэвид Стрейд, Брайан Триппе, Шашват Ваджпей, Бою Ван, Лилли Ван, Тиа Чжао и Лиюань Чжу

Информация о финансировании

Эта статья была поддержана следующим грантом:

Дополнительная информация

Конкурирующие интересы

Авторы заявляют об отсутствии конкурирующих интересов.

Вклад авторов

SZ, Концепция и дизайн, Сбор данных, Анализ и интерпретация данных, Составление или исправление статьи.

YE, Концепция и дизайн, Сбор данных, Анализ и интерпретация данных, Составление или редактирование статьи.

Литература

• Альтман РБ. Учебная программа по биоинформатике: время пришло. Биоинформатика. 1998. 14: 549–550. DOI: 10.1093 / биоинформатика / 14.7.549. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Донован С.Большие данные: обучение должно развиваться, чтобы идти в ногу с прогрессом. Природа. 2008; 455: 461. DOI: 10.1038 / 455461d. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Эрлих Ю. Видение повсеместного секвенирования. Геномные исследования. 2015; 25: 1411–1416. DOI: 10.1101 / gr.191692.115. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Эванс К.Х., Оздалга Э., Ахуджа Н. Медицинское образование поколения Y. Академическая психиатрия. 2016; 40: 382–385. DOI: 10.1007 / s40596-015-0399-5. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Gardy J, Loman NJ, Rambaut A.Цифровой надзор за патогенами в реальном времени — время , сейчас . Геномная биология. 2015; 16: e14258. DOI: 10.1186 / s13059-015-0726-х. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Юул С., Искьердо Ф., Херст А., Дай Х, Райт А., Кулеша Е., Пететт Р., Тернер Д. Д.. Что в моем горшке? Определение вида миньона в реальном времени. bioRxiv. 2015 г. DOI: 10.1101 / 030742. [CrossRef] [Google Scholar]
• Кайзер М., де Книжфф П. Улучшение судебной экспертизы человека за счет достижений в области генетики, геномики и молекулярной биологии .Природа Обзоры Генетики. 2011; 12: 179–192. DOI: 10,1038 / nrg2952. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Леви С., Саттон Дж., Нг ПК, Феук Л., Халперн А. Л., Валенц Б. П., Аксельрод Н., Хуанг Дж., Киркнесс Е. Ф., Денисов Г., Лин И., Макдональд Дж. Р., Панг А. В. , Шаго М., Стоквелл Т.Б., Циамури А., Бафна V, Бансал V, Кравиц С.А., Бусам Д.А., Бисон К.Ю., Макинтош Т.С., Ремингтон К.А., Абрил Дж.Ф., Гилл Дж., Борман Дж., Роджерс Ю.Х., Фрейзер М.Э., Шерер С.В., Штраусберг Р.Л., Вентер Дж. Последовательность диплоидного генома отдельного человека. PLoS Биология.2007; 5: e14258. DOI: 10.1371 / journal.pbio.0050254. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Lin Z, Owen AB, Altman RB. Генетика. геномные исследования и конфиденциальность людей. Наука. 2004; 305: 183. DOI: 10.1126 / science.1095019. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Линдерман М.Д., Башир А., Диас Г.А., Касарскис А., Сандерсон С.К., Зинберг Р.Э., Махаджан М., Шах Х., Сукьель С., Цвейг М., Шадт Э. Подготовка следующего поколения геномистов: лабораторный курс по медицинской геномике.BMC Medical Genomics. 2015; 8: e14258. DOI: 10.1186 / s12920-015-0124-у. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Magana AJ, Taleyarkhan M, Alvarado DR, Kane M, Springer J, Clase K. Обзор научной литературы, описывающей область образования в области биоинформатики и образовательных исследований в области биоинформатики . CBE Life Sciences Education. 2014; 13: 607–623. DOI: 10.1187 / cbe.13-10-0193. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• McIntyre ABR, Rizzardi L, Yu AM, Rosen GL, Alexander N, Botkin DJ, John KK.Секвенирование нанопор в условиях микрогравитации. BioRxiv. 2015 г. DOI: 10.1101 / 032342. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Reisdorph N, Stearman R, Kechris K, Phang TL, Reisdorph R, Prenni J, Erle DJ, Coldren C, Schey K, Nesvizhskii A, Geraci M. Практические семинары как эффективное средство изучения передовых технологий, включая геномику, протеомику и биоинформатику. Геномика, протеомика и биоинформатика. 2013; 11: 368. DOI: 10.1016 / j.gpb.2013.10.002. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Шапиро С., Айон С., Моберг-Паркер Дж., Левис-Фицджеральд М., Сандерс Э.Р.Стратегии эффективного использования взаимного обучения в бакалавриате по биоинформатике. Биохимия и молекулярная биология образования. 2013; 41: 24–33. DOI: 10.1002 / bmb.20665. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

Быстрая повторная идентификация образцов человека с помощью портативного секвенирования ДНК

[Примечание редакции: следует апелляционное письмо авторов в ответ на первый раунд рецензирования.]

Из комментариев рецензентов ниже вы увидите, что они согласились с тем, что методология идентификации людей или клеточных линий с использованием данных MinION с очень низким охватом, при условии наличия существующей справочной базы данных, является надежной и что результаты применения подхода к Идентификация индивидуума и клеточной линии стала убедительной теоретической демонстрацией этого метода.Тем не менее, рецензенты выразили серьезную озабоченность по поводу практической полезности этого подхода в судебной экспертизе и идентификации клеточных линий, например, из-за отсутствия ссылки и влияния контаминации. Учитывая, что выделенные приложения являются центральным элементом статьи, рецензенты рекомендовали рассмотреть другие приложения, потенциально не относящиеся к области генетики человека, которые в более широком смысле увеличили бы влияние метода.

Большое спасибо за ваше внимательное чтение нашей статьи и за комментарии рецензентов.Мы очень рады, что все рецензенты единогласно согласились, что наш метод надежен и убедителен. Однако мы были удивлены, обнаружив, что был также сделан вывод об отсутствии (потенциальных) приложений. Мы твердо уверены, что существует набор очень эффективных приложений нашего метода, которые могут только расшириться в будущем. Мы опасаемся, что нам не удалось передать это в достаточной степени в нашей рукописи, и надеемся, что вы пересмотрите свое решение на основе аргументов, которые мы приводим ниже:

Загрязнение клеточной линии — давняя и постоянная проблема академических, клинических и коммерческих исследований.Доступных решений для аутентификации клеточных линий явно недостаточно, поскольку загрязнение по-прежнему является серьезным экономическим бременем для общества, несмотря на то, что оно было признано почти 50 лет назад. Проблемы контаминации клеточной линии и аутентификации очень хорошо описаны Almeida et al 2016 PLOS Biology. Мы хотели бы пояснить пару поднятых вопросов:

1. Загрязнение и быстрая идентификация: аутентификация клеточной линии выигрывает от возможности идентифицировать контаминацию образца на самой ранней стадии.Текущие национальные руководящие принципы США по ASN0002 заявляют, что линия клеток является чистой, если STR имеют 80% совпадение с одной из записей в базе данных. Только при совпадении STR <56% клеточная линия считается загрязненной. Наш метод лучше и применим, чем существующие методы, в двух важных аспектах:

1. Аутентификация клеточной линии не является статическим одноразовым тестом: перенос пары клеток из одной культуры в другую происходит по ошибке человека. Только клетки, которые быстро размножаются по сравнению с исходной линией клеток, могут поставить под угрозу исследования, проводимые с течением времени.Поэтому периодическое тестирование всех клеточных линий в лаборатории имеет решающее значение, поскольку только периодическое тестирование покажет, что линия клеток загрязнена. ATCC требуется две недели, чтобы получить результаты теста , а это означает, что к тому времени, когда исследователь получит свои результаты обратно, контаминант может перерасти культуру. Наш метод создания эскизов MinION обеспечивает быстрое и локальное решение для периодического тестирования клеточных линий, позволяя исследователям быть полностью осведомленными о состоянии своих клеточных линий во время эксперимента.Даже при загрязнении 10% наш метод редко обеспечивает надежное совпадение, что свидетельствует о загрязнении в клеточной линии. Кроме того, мы можем надежно определить загрязнение до 20%, что является важным двукратным улучшением по сравнению со стандартом ASN0002, который отклоняет чистую клеточную линию только при совпадении <56%.

2. Перемешивание образцов: замена клеточных линий время от времени происходит в лабораториях, и это будет 100% -ное заражение. Эскиз MinION обеспечит идеальную, мгновенную проверку работоспособности любого исследователя перед началом эксперимента.

2. Анализ загрязнения с использованием SNP в сравнении с STR: линии раковых клеток обычно очень нестабильны и быстро размножаются. STR с большей вероятностью несут мутации, чем SNP, и поэтому даже чистая линия раковых клеток обычно приводит к неоднородному сочетанию длин повторов. Следовательно, рекомендации ASN0002 устанавливают порог при 80% -ном совпадении для чистых линий раковых клеток. Таким образом, наш эскиз MinION на основе SNP обеспечивает более высокую точность обнаружения загрязнений в линиях раковых клеток.

3. Доступность справочной базы данных: энциклопедия линий раковых клеток, созданная Институтом Броуда, предоставляет около 1099 справочных файлов для широкой публики. Это только начало, и база данных будет обновляться по мере увеличения количества доступных клеточных линий. Когда наш метод используется для целей судебной экспертизы, необходимо учитывать этические вопросы — однако соответствующие (государственные) органы, регулирующие судебно-медицинские исследования и расследования, должны иметь возможность формулировать правила, позволяющие использовать наш метод вместе с соответствующими справочными базами данных (см. Ниже ) в криминалистике.

4. Стоимость: Стоимость секвенирования продолжает стремительно падать, и эта тенденция, скорее всего, сохранится в ближайшем будущем. Когда образцы мультиплексируются с использованием 12 штрих-кодов, стоимость нашего метода создания эскизов MinION в настоящее время уже сопоставима с доступным методом аутентификации клеточной линии через ATCC и даже ниже его. Разница между нашим методом создания эскизов MinION и методом ATCC заключается в том, что исследователям не нужно ждать две недели, чтобы получить результаты теста.

5.Концентрация ДНК: для аутентификации клеточной линии нам не нужно беспокоиться о доступности входящей ДНК так сильно, как это необходимо для судебной экспертизы. Даже не расширяя границы возможного, мы смогли идентифицировать человека с помощью ДНК размером 50 нг. Наш метод может использоваться в дополнение к этапу ПЦР-амплификации информативных SNP, что может быть расширением метода в ситуации с чрезвычайно низким входным образцом ДНК. Однако мы допускаем, что это добавило бы трудоемкого этапа в протоколе.

6. Расширение до других областей: наш метод вполне может быть подходящим для других областей, таких как аутентификация линии клеток мышей, и для тестирования чистоты C. elegans , дрозофилы, растений и даже дрожжевых стоков. Эта статья может стать первым шагом к тому, чтобы сделать тестирование на чистоту более удобным для исследователей из разных областей наук о жизни — это причина, по которой мы думаем, что эта статья будет идеальной для eLife с ее широким кругом читателей.

Криминалистические приложения: мы очень хорошо знаем область исследований STR, и лаборатория Эрлиха опубликовала несколько ключевых статей в этой области (например,г. Gymrek et al., Nature Genetics, 2016). Мы полностью согласны с рецензентом 2, что судебно-медицинское сообщество не заменит свою систему STR CODIS только из-за нашей рукописи.

Сказав это, кажется, что наш MinION

вызывает некоторое волнение. Метод

зарисовок в судебно-медицинском сообществе. Национальный институт юстиции (NIJ) финансировал нашу работу, а Американская академия судебных наук (AAFS) пригласила нас представить эту работу на сессии по судебной экспертизе ДНК на их ежегодном собрании 2016 года в Лас-Вегасе.После нашей презентации на собрании AAFS с нами связалась группа исследователей из группы судебно-медицинских экспертов Battelle, одного из крупнейших государственных подрядчиков в этой области. Они были заинтересованы в том, чтобы протестировать наш метод на своих образцах для специального отчета Министерству обороны (DoD). Нас также пригласили представить эту работу на заседании группы Oxford Nanopore Technologies, и мы получили запросы от Нью-Йоркского университета и немецких сотрудников на использование нашего метода для портативной повторной идентификации сельскохозяйственных культур и животных в полях.

Мы не предполагаем, что в ближайшем будущем наш метод будет конкурировать с методом STR в регулярной судебной экспертизе. Тем не менее, мы действительно наблюдаем такие ситуации, как массовые бедствия масштаба 11 сентября, цунами 2004 года или землетрясение Тохоку, которые потребуют идентификации большого количества жертв в обстоятельствах, когда транспортировка тканей в лаборатории является логистически сложной. Создание эскизов MinION позволит быстро генерировать сигнатуры ДНК на месте с помощью недорогого стандартного портативного устройства.Есть также другие криминалистические задачи, особенно в Министерстве обороны, которые сильно выиграют от создания эскизов MinION.

Приносим извинения за то, что текст нашей рукописи не был достаточно ясным, чтобы описать преимущества нашего метода и наши мотивы, стоящие за его разработкой. В свете вышеизложенной информации, не могли бы вы рассмотреть возможность предоставления нам возможности повысить ясность нашего текста, учесть все комментарии рецензентов и повторно отправить?

[Примечание редакции: теперь следует ответ авторов по пунктам на первый раунд рецензирования.]

Рецензент № 1:

Меня не беспокоит статистический подход, но мне было непонятно, как производительность алгоритма зависит от свойств используемых SNP. С общими SNP будет больше вероятность совпадения генотипа со случайным образцом ДНК? Но, предположительно, общие SNP с большей вероятностью будут указаны в соответствующих базах данных? Может ли база данных 31 000 человек быть репрезентативной для баз данных ДНК, используемых в судебной экспертизе (которые, как я все еще думал, в основном основывались на STR, а не на SNP)? Насколько подход зависит от количества лиц и количества SNP в ссылке? Точно так же с аутентификацией клеточной линии, какое влияние использование другой технологии в справочнике оказывает на полезность и интерпретацию результатов? Я также не видел обсуждения «правил остановки» — как метод определяет наличие достаточных доказательств того, что совпадения нет (поскольку априорная вероятность совпадения будет мала)?

Большое спасибо за эти замечательные вопросы.Мы рассмотрим их один за другим, и в документе мы также прояснили поднятые вопросы.

SNP:

При сопоставлении двух профилей ДНК (эскиза MinION и данных массива SNP) наш алгоритм учитывает вероятность совпадения и отсутствия совпадения (то есть вероятность случайного совпадения). Например, для вероятности «совпадения»: если в позиции chr1: 10,000 MinION сообщил «C», а dbSNP сообщил о варианте «C / G», тогда вероятность совпадения получит значение: 1- (коэффициент ошибок).

Для вероятности «несоответствия» учитывается частота аллеля.Скажем, последовательность C в этой позиции очень часто встречается в популяции (например, 90% людей в популяции имеют C на chr1: 10 000). В этом случае мы рассматриваем эту вероятность «несоответствия» (насколько вероятно, что мы увидим этот аллель в популяции, если бы мы случайным образом секвенировали индивидуума?). С другой стороны, если бы этот вариант был G, мы получили бы много информации, так как вряд ли кто-то случайно встретит этот упорядоченный вариант. Вы можете найти это отражение в знаменателе нашего алгоритма в разделе «Материалы и методы».В разделе «Материалы и методы» мы более подробно описываем все детали модели. Обратите внимание, что мы используем только общие SNP с частотами аллелей от 1 до 99%.

База данных:

Большинство баз данных для криминалистики, а также многие базы данных по линиям клеток основаны на STR. Судебные базы данных содержат миллионы профилей ДНК (https://www.fbi.gov/services/laboratory/biometricanalysis/codis/ndis-statistics). Действительно, эти базы данных несовместимы с нашим методом эскиза MinION. Однако для исследовательских и клинических целей клеточные линии и образцы тканей обычно генотипируются с использованием массивов SNP или WGS, и эти справочные файлы данных совместимы с эскизами MinION (пример: справочные файлы CCLE, которые мы приводим в этой рукописи).В криминалистике люди все еще не решаются использовать базы данных на основе SNP, однако для конкретных приложений, таких как идентификация жертв массовых бедствий, могут быть полезны ссылочные файлы массивов SNP, которые были созданы либо правоохранительными органами, либо DTC. Все больше людей уже публикуют свои справочные файлы в Интернете через openSNP, и эта общедоступная база данных растет. База данных DNA.land не является общедоступной, но служит доказательством принципа базы данных для тестирования нашего метода.

Размер базы данных: наш метод сопоставляет эскиз MinION с одним справочным файлом в базе данных за раз и вычисляет апостериорную вероятность совпадения. Эти расчеты не зависят от размера используемой базы данных. Однако чем больше база данных, тем больше вероятность того, что эталонный файл, который должен соответствовать скетчу MinION, присутствует в базе данных. У нас действительно есть априор, который отражает пространство поиска — на рисунке 2 — рисунок в дополнении 1 присутствует в данных, мы исследуем эффект изменения априорного значения и обнаруживаем, что наш метод является надежным, даже если мы предполагаем, что население всего мира (7.5 * 10 ⁹ ).

Количество SNP в справочном файле: в качестве примера; запуск MinION в течение одного часа (для SZ001) привел к выделению 13 453 распространенных вариантов. Пересекаясь с ее справочным файлом (560 тыс. SNP), пересеклись только 457 вариантов. Конечно, каждый запуск MinION дает разные результаты. Таким образом, чем больше считываний проходит через нанопоры за единицу времени, тем большее количество вариантов зарисовывается и пересекается с эталонными файлами, и тем быстрее может быть достигнута повторная идентификация образца.И действительно, большее количество SNP в эталонных файлах увеличивает вероятность пересечения SNP из скетча MinION.

Большое спасибо за то, что подняли «правила остановки». Мы добавили анализ, чтобы найти минимальное количество SNP, чтобы сделать вывод о совпадении. (Рисунок 4B). Пересечения 300 SNP было достаточно, чтобы найти правильный соответствующий эталонный файл для 99,6% скетчей MinION, которые мы смоделировали. Преодоление этого количества SNP без соблюдения апостериорной вероятности, которая не достигает 99 и остается на ней.9% означает, что соответствующий справочный файл, скорее всего, отсутствует в базе данных.

Хотя алгоритм в настоящее время определен как обеспечивающий вероятности совпадения, можно ли расширить этот подход для определения вероятностей того, что образцы взяты от близких родственников?

Это отличный момент. В этой рукописи мы хотели установить надежный метод для определения точного совпадения. Даже родственник первой степени не идентифицируется как подходящий кандидат с помощью нашего метода, что было важным тестом для проверки нашего метода.Мы полностью согласны с тем, что семейное сопоставление было бы ценным обогащением пространства поиска, и поэтому в настоящее время мы работаем над этим расширением метода. Однако для того, чтобы сделать наш алгоритм надежным и подходящим для определения семейных совпадений, потребуются серьезные дополнения, и мы считаем, что это заслуживает отдельной рукописи. Вдобавок к этому, хотя семейное сопоставление потенциально откроет ряд дополнительных приложений в судебной медицине, оно не повлияет на применимость нашего метода в аутентификации клеточных линий и тканей в биобанках и клинике.Добавление этого ослабит нашу способность выделять основные проблемы с аутентификацией, которые вызывают давние и постоянные проблемы с воспроизводимостью исследований и для которых наш метод может быть важной частью решения.

Утверждается, что новый подход является быстрым и недорогим, но так ли важна потребность в «быстром» ответе в приложениях судебной экспертизы или аутентификации клеточной линии? Как новый подход сравнивается с точки зрения необходимого количества ДНК по сравнению с используемыми в настоящее время методами, и снижает ли это полезность?

Мы благодарим рецензента за то, что он поднял этот вопрос, так что у нас есть возможность пояснить наши рассуждения.

Зачем нужна быстрая аутентификация по клеточной линии?

1) Клеточные линии и их потенциальные загрязнители являются живыми и динамическими объектами. Две недели культивирования могут кардинально изменить состав клеточной культуры. Мы добавили в рукопись имитационный анализ, который показывает этот эффект с течением времени (рисунок 5 — приложение к рисунку 1). Крайне важно иметь возможность периодически контролировать геномный состав популяции клеток в культуре, чтобы исследователи могли быть уверены, что все эксперименты проводятся с чистыми и проверенными клеточными линиями.Мы добавили в Обсуждение разделы, в которых подробно рассматривается этот вопрос.

2) Поскольку периодические испытания необходимы всякий раз, когда кто-то работает с биологическими материалами и, в частности, клеточными линиями, метод повторной идентификации должен быть простым и быстрым для исследователей или клиницистов. Основная причина давних проблем с аутентификацией по клеточной линии — человеческое поведение. Ни у кого нет времени. Поэтому предоставление метода, который можно выполнить за час, потенциально может иметь большое значение в решении проблемы нежелания тестировать клеточные линии.

Зачем нужна быстрая повторная идентификация в криминалистике?

В настоящее время профилирование ДНК для целей судебной экспертизы страдает от задержки, необходимой для транспортировки и тестирования образца, в дополнение к доступности соответствующего оборудования. Известно, что существует огромная задержка в обработке образцов для профилирования ДНК, например, из наборов для изнасилования, что, среди прочего, связано с нехваткой доступной рабочей силы и оборудования

(http://www.endthebacklog.org/backlog/what-rape-kit-backlog).Задержка с тестированием означает, что тем временем преступник может совершать дальнейшие преступления.

На месте преступления зарисовка MinION может быть первой проверкой на месте, чтобы иметь возможность действовать быстро и предотвратить дальнейшее преступление.

Стоимость упоминается как проблема судебной экспертизы; тем не менее, такое недорогое устройство, как MinION, потенциально может быть распространено среди большей части полицейского корпуса и управляться слабо обученными полицейскими. Это могло бы помочь повысить эффективность работы полиции.Мы уже полностью там? Пока нет, нам нужны такие устройства, как «Zumbador» для выделения ДНК и подготовки образцов (в разработке в ONT), чтобы иметь возможность проводить повторную идентификацию образцов ДНК на месте с минимальными усилиями. Дальнейшие исследования также позволят идентифицировать смешанные образцы. Широкомасштабное внедрение потребует снижения стоимости одной проточной кюветы. Даже в этом случае наш метод может внести свой вклад в еще один важный шаг к новой системе, в которой ни один образец ДНК в судебной медицине не остается непроверенным.

Концентрация ДНК:

Для аутентификации клеточной линии концентрация ДНК не является проблемой, в большинстве ситуаций присутствует достаточно материала ДНК.

Для криминалистов концентрация ДНК действительно может быть важной ограничивающей проблемой. Шаг амплификации всего генома для разреженных участков генома, обнаруженных в образце, можно добавить в протокол подготовки библиотеки для создания эскизов MinION. В частности, в этих случаях мы думаем, что отсутствие необходимости полагаться на определенные сайты, а возможность случайного отбора SNP по всему геному увеличивает шанс нахождения совпадения, если в используемой справочной базе данных присутствует правильный файл соответствия.

Рецензент № 2:

В этой рукописи описывается использование коммерчески доступной системы MinION, основанной на секвенировании с помощью технологии нанопор, для анализа ограниченного числа 4 (словами: четырех) образцов ДНК в различных технических сценариях.Затем авторы сравнили результат MinION с базой данных микрочипов SNP, которую они собрали у компаний, напрямую обращающихся к потребителю, и из других источников, чтобы установить выборочные совпадения с использованием разработанного ими байесовского алгоритма. Они утверждают, что, помимо относительно высокой частоты ошибок MinION, их алгоритм предоставляет доказательства соответствия выборки, вероятно, из-за большого количества SNP, генерируемых обоими подходами. Основываясь на своих результатах, авторы предлагают будущее практическое использование этого подхода для целей повторной идентификации в криминалистике и других областях и отстаивают его преимущество в виде дешевого, быстрого и без ПЦР подхода, который контрастирует с более дорогим и медленным подходом ПЦР. в настоящее время используется, например, в криминалистике.Помимо того, что неясно, какое преимущество заключается в ускорении повторной идентификации за счет использования подверженного ошибкам устройства секвенирования (которое, в свою очередь, требует статистического подхода для компенсации ошибок), также неясно, почему ПЦР- свободный подход дает преимущество для данных такого типа.

Мы благодарим рецензента за то, что он поднял этот вопрос, так что у нас есть возможность пояснить наши рассуждения.

Зачем нужна быстрая аутентификация по клеточной линии?

1) Клеточные линии и их потенциальные загрязнители являются живыми и динамическими объектами.Две недели культивирования могут кардинально изменить состав клеточной культуры. Мы добавили в рукопись имитационный анализ, который показывает этот эффект с течением времени (рисунок 5 — приложение к рисунку 1). Крайне важно иметь возможность периодически контролировать геномный состав популяции клеток в культуре, чтобы исследователи могли быть уверены, что все эксперименты проводятся с чистыми и проверенными клеточными линиями. Мы добавили в Обсуждение разделы, в которых подробно рассматривается этот вопрос.

2) Поскольку периодические испытания необходимы всякий раз, когда кто-то работает с биологическими материалами и, в частности, клеточными линиями, метод повторной идентификации должен быть простым и быстрым для исследователей или клиницистов.Основная причина давних проблем с аутентификацией по клеточной линии — человеческое поведение. Ни у кого нет времени. Поэтому предоставление метода, который можно выполнить за час, потенциально может иметь большое значение в решении проблемы нежелания тестировать клеточные линии.

Зачем нужна быстрая повторная идентификация в криминалистике?

В настоящее время профилирование ДНК для целей судебной экспертизы страдает от задержки, необходимой для транспортировки и тестирования образца, в дополнение к доступности соответствующего оборудования.Известно об огромном отставании в обработке образцов для профилирования ДНК, например, из наборов для изнасилования, что, среди прочего, связано с нехваткой доступной рабочей силы и оборудования

(http://www.endthebacklog.org/backlog/what-rape-kit-backlog). Задержка с тестированием означает, что тем временем преступник может совершать дальнейшие преступления.

На месте преступления зарисовка MinION может быть первой проверкой на месте, чтобы иметь возможность действовать быстро и предотвратить дальнейшее преступление.

Стоимость упоминается как проблема судебной экспертизы; тем не менее, такое недорогое устройство, как MinION, потенциально может быть распространено среди большей части полицейского корпуса и управляться слабо обученными полицейскими.Это могло бы помочь повысить эффективность работы полиции. Мы уже полностью там? Пока нет, нам нужны такие устройства, как «Zumbador» для выделения ДНК и подготовки образцов (в разработке в ONT), чтобы иметь возможность проводить повторную идентификацию образцов ДНК на месте с минимальными усилиями. Дальнейшие исследования также позволят идентифицировать смешанные образцы. Широкомасштабное внедрение потребует снижения стоимости одной проточной кюветы. Даже в этом случае наш метод может внести свой вклад в еще один важный шаг к новой системе, в которой ни один образец ДНК в судебной медицине не остается непроверенным.

Почему метод без ПЦР дает преимущество? Наши рассуждения следующие:

• Во-вторых, текущие протоколы в основном используют специфические для человека праймеры для ПЦР, и поэтому загрязнители от других видов не могут быть обнаружены [Alston-Roberts, Nature reviews 2010].

• В-третьих, линии раковых клеток генетически нестабильны, и потеря гетерозиготности или микросателлитная нестабильность приводят к снижению точности сопоставления. Независимо от того, выбираете ли вы амплификацию ДНК с использованием подхода амплификации всего генома или вообще не используйте ПЦР, любой подход может быть частью надежного метода повторной идентификации, поскольку нет необходимости полагаться на ограниченное количество конкретных биаллельных сайтов. .Использование небольшого набора маркеров делает метод повторной идентификации чувствительным к выпадению аллелей.

Очевидно, что STR-типирование выигрывает от избегания PCR, поскольку это устраняет мешающие артефакты проскальзывания, которые могут затруднять повторную идентификацию; однако SNP не создают артефактов проскальзывания. Очевидно, что общее преимущество использования ПЦР для целей идентификации состоит в том, что можно успешно использовать небольшие количества ДНК, что особенно подходит для судебно-медицинской идентификации.Однако я не могу найти в рукописи пределы чувствительности этого подхода, которые, как я ожидаю, будут выше (т. Е. Требуется больше ДНК), чем это возможно при использовании ПЦР, что ограничит применение.

Концентрация ДНК:

Для аутентификации клеточной линии концентрация ДНК не является проблемой, в большинстве ситуаций присутствует достаточно материала ДНК.

Для криминалистов концентрация ДНК может быть важным ограничивающим фактором. Шаг амплификации всего генома для разреженных участков генома, обнаруженных в образце, можно добавить в протокол подготовки библиотеки для создания эскизов MinION.В частности, в этих случаях мы думаем, что отсутствие необходимости полагаться на определенные сайты, а возможность случайного отбора SNP по всему геному увеличивает шанс нахождения совпадения, если в используемой справочной базе данных присутствует правильный файл соответствия.

Более того, предлагая использовать свой подход в судебной экспертизе, авторы, кажется, игнорируют тот факт, что SNP не используются в рутинном судебном анализе ДНК, несмотря на их технические преимущества, заключающиеся в предотвращении артефактов проскальзывания и т. Д. Просто потому, что справочные базы данных судебной экспертизы состоят из СПО.Следовательно, даже игнорируя различные предостережения этого подхода, когда речь идет о надежности и надежности судебно-медицинской экспертизы ДНК, которую я не вижу подтвержденной в этом исследовании, полезность их подхода для целей идентификации в судебной экспертизе, как предлагается авторами, делает на практике не существует.

Приносим извинения за то, что не указали это четко в тексте. Мы добавили в обсуждение, надеюсь, более четкие указатели, чтобы подчеркнуть важность подходящих справочных баз данных и тот факт, что текущие базы данных основаны на STR.

На данный момент частота ошибок MinION слишком высока для последовательности STR, например, см. Https://nanoporetech.com/publications/2015/08/04/sequencing-analysing-and-counting-shorttandem-repeats -он-миньон-2. Мы не чувствовали, что дополнительный эксперимент принесет пользу рукописи, чтобы продемонстрировать это дальше.

Прямое сравнение статистической мощности с использованием STR-маркеров и маркеров SNP для повторной идентификации выполнено (среди прочих) Sanchez et al., 2010 и Yu et al., 2015, в ходе обсуждения мы поясняем это дополнительно.

И даже если базы данных судебно-медицинской экспертизы ДНК когда-либо перейдут на SNP, что обсуждается в течение многих лет, но ни одна страна не адаптировала это, предлагаемый подход не будет подходящим, потому что он потребует, чтобы контрольные образцы и следовые образцы были проанализированы. с разными технологиями, что вызывает дополнительные сложности, которых можно избежать за счет использования одних и тех же маркеров и технологий для обоих типов криминалистических образцов, как это имеет место в настоящее время.

В криминалистике идеально было бы использовать одно и то же устройство для повторной идентификации и для создания профиля, чтобы сделать создание базы данных эффективным с точки зрения логистики.И все же то, что имеет наивысший приоритет; факт, что вы потенциально можете повторно идентифицировать ДНК быстро и на месте, или эффективность построения системы баз данных? Этот вопрос необходимо будет рассматривать для каждой возможности применения (возможно, не для регулярного тестирования на месте преступления прямо сейчас, но после массовых бедствий, возможно, придется создать новые справочные базы данных, которые выиграют от того, что они основаны на SNP, поскольку люди могут отправлять свои файлы, созданные DTC для пример — здесь цель найти любимого человека, и люди будут готовы помочь).Наш метод может открыть новые возможности.

Для применения аутентификации по клеточной линии в этой рукописи показано, что мы можем надежно использовать массивы SNP в сочетании со скетчем MinION для повторной идентификации образца. Это имеет особое применение для тестирования клеточной линии после поступления в лабораторию и для критической проверки работоспособности или после обширного пассирования. Для этого приложения не представляется очевидным преимущество создания базы данных и повторной идентификации одним и тем же устройством.

Является ли их разработанный байесовский подход, который позволяет сопоставить подверженные ошибкам данные MinION с данными микроматрицы SNP с низким уровнем ошибок, которые для меня являются сердцем этой рукописи, но не ее применением, технически обоснованным и достаточно новым, чтобы оправдать публикацию в высококлассном журнал наук о жизни, ускользающий от технических знаний этого рецензента и должен оцениваться экспертом по статистической генетике; предлагаемое применение их подхода для целей повторной идентификации, по крайней мере, в области судебной экспертизы — нет.Другой вопрос статистической генетики, который должен быть оценен соответствующим экспертом, заключается в том, действительно ли количество SNP, сопоставленных между MinION и набором данных эталонного массива, действительно достаточно для статистически надежной индивидуальной идентификации, которая зависит не только от номеров SNP, но и по степени вариации. Однако из того, что я вижу, я ожидаю, что совпадения SNP между обоими наборами данных будут разными у разных людей, этот вопрос потребует тщательной оценки с использованием гораздо большего количества данных, чем представлено здесь.

Мы благодарим рецензента за разъяснение этих моментов. Мы изменили рукопись и надеемся, что она передает наше сообщение более ясно и убедительно.

Во-первых, мы перенаправили фокус нашей рукописи на незамедлительно реализуемое приложение нашего метода, а именно на аутентификацию по клеточной линии. Наш метод может быть реализован очень быстро на месте и сразу же может быть принят лабораториями. Мы надеемся, что это будет способствовать значительному прогрессу в сокращении использования неизвестных клеточных линий.

Во-вторых, для области криминалистики:

• Многочисленные исследования показали, что статистическая мощность 48-52 SNP сопоставима с используемыми в настоящее время 10-15 STR (например: Sanchez et al., 2010 и Yu et al., 2015. Кроме того, Lin et al. , 2004 показали теоретически, что ~ 80 случайных SNP достаточно, чтобы отличить людей друг от друга. Наше исследование показывает, что мы действительно повторно идентифицируем ДНК, используя только 60-300 маркеров SNP. Причина нашего диапазона: A) мы произвольно выбираем из генома и встречаются варианты, которые более информативны, чем другие, из-за их частоты аллелей.Это преимущество, поскольку мы не полагаемся на определенные участки генома и, следовательно, не страдаем от выпадения аллелей. Б) Мы должны работать с относительно высоким уровнем ошибок. Тем не менее, в нашей рукописи мы показываем, что мы надежно идентифицируем людей без исключений.

• Мы признаем, что еще предстоит преодолеть ряд серьезных препятствий, прежде чем этот метод можно будет внедрить в полевых условиях. Однако разве рецензент не согласен с тем, что есть возможности для улучшения наших методологий судебной экспертизы с точки зрения скорости и эффективности? Эта рукопись предлагает надежный способ сделать это с использованием передовых технологий и предлагает еще один шаг вперед, чтобы это произошло.

Рецензент № 3:

[…] Мои основные опасения по поводу этой работы в основном связаны с тем, имеет ли она подлинное практическое применение. Первый пример идентификации человека кажется ограниченным по полезности по следующим причинам:

1) Для этого требуется справочная база данных, созданная на основе полногеномных последовательностей или панелей генотипирования. (И данные, сгенерированные этим методом, не могут быть использованы для заполнения такой базы данных, что означает необходимость параллельного построения базы данных ссылок).

2) База данных, используемая для этой работы с веб-сайта DNA.land, не является общедоступной (и не может быть по соображениям конфиденциальности), чтобы другие могли воспроизводить эту работу.

3) Даже если бы было — надо ли поощрять такую ​​работу? Мне немного сложно представить себе вне судебно-медицинских расследований, когда способность идентифицировать людей по их ДНК была бы чем-то обычным.

В отсутствие крупномасштабных генетических баз данных трудно понять, как это может быть полезно.Будут ли авторы выступать за сбор властями идентифицируемых крупномасштабных генетических баз данных? Как это будет работать на практике? Если нет, то это чисто теоретическая демонстрация?

Большое спасибо за вдумчивое введение и положительные отзывы.

Файлы

DNA.land не публикуются по причинам защиты конфиденциальности пользователей — однако обратите внимание, что эта база данных включает 1446 справочных файлов, доступных на OpenSNP.org (описанных в разделе «Материалы и методы»).Эти файлы можно загрузить и использовать в качестве базы данных для воспроизведения наших результатов. Каждому судебно-медицинскому органу необходимо будет создать свою собственную базу данных (защищенную конфиденциальностью), аналогичную применяемой в настоящее время системе CODIS. Поскольку использование массивов SNP и WGS для генотипирования пациентов становится стандартной практикой в ​​биобанках и больницах в рамках усилий по « персонализированной медицине », каждое учреждение, по сути, создаст (d) свою собственную справочную базу данных, которая может использоваться для выборки. аутентификация в доме, когда это необходимо.

Кроме того, наша работа, безусловно, может быть воспроизведена:

• Геномы YE001, JP001 и образцы HapMap (NA12890) доступны в Интернете (https://dna.land/consent). Чтобы увеличить размер базы данных, можно загрузить справочные файлы OpenSNP.org. Можно приобрести образцы ДНК NA12890 — и можно запросить ДНК из YE001, SZ001 и JP001, если это необходимо, по разумному запросу.

• Для аутентификации по линии клеток мы обращаемся к базе данных CCLE (1099 справочных файлов).Наш метод может быть протестирован, и наши данные могут быть воспроизведены с использованием этой базы данных и ДНК из любой клеточной линии в базе данных CCLE.

Базы данных криминалистической экспертизы действительно сложнее построить по сравнению с базой данных клеточных линий. Это потребует изменения применяемых в настоящее время методологий, на что могут уйти годы. Однако конкретные приложения могут быть применимы сразу же. Например, для внезапных крупномасштабных событий (массовые бедствия, такие как 9/11) можно использовать массивы SNP, что является эффективным способом определения вариантов одного человека.Это может использоваться вместе с эскизами MinION для быстрой идентификации жертв. Мы понимаем, что это займет некоторое время.

Первой возможностью реализации этого метода будет проверка подлинности клеточных линий и образцов тканей — наш метод можно сразу же использовать в лабораториях.

Второй приведенный пример — идентификация клеточной линии — действительно кажется потенциальным практическим применением, хотя в настоящее время стоимость такого анализа, вероятно, препятствует его внедрению по сравнению с более простым подходом к идентификации на основе STR-панелей.Хотя авторы заявляют, что это делается путем отправки образцов и за большие деньги, это также доступно исследователям для проведения в их собственных лабораториях по невысокой цене (система GenePrint от ProMega по цене <10 долл. / Шт.). Авторы могут захотеть обсудить, как снизить стоимость до аналогичного уровня.

Баланс между затратами на рабочую силу и стоимостью амортизации оборудования и расходных материалов представляет собой компромисс для всех методологий. Тем не менее, потребность в обширной практической лабораторной работе, по-видимому, является основным фактором, позволяющим избежать проверок аутентификации.Это, в свою очередь, обходится сообществу в целом гораздо дороже, поскольку публикуются все более невоспроизводимые исследования, основанные на загрязненных или смешанных биологических материалах.

Система Geneprint требует практической работы в лаборатории для амплификации и проверки STR-фрагментов. Как подробно описано в нескольких ссылках, которые мы цитируем в рукописи, каким-то образом современные методы аутентификации не используются в качестве рутинных лабораторных тестов. Более того, система GenePrint может быть дешевой в расчете на один образец, для этого необходимо приобрести устройство для капиллярного электрофореза от Thermo Fisher Applied Biosystems®, которое стоит ~ 120 тысяч долларов.Это резко контрастирует с MinION, где начальные затраты составляют всего 1000 долларов США, после чего можно приобрести расходные материалы (~ 100 долларов США за образец) и использовать их для метода аутентификации, который мы представляем, который требует минимальных затрат усилий в лаборатории.

Для единственного относительно небольшого количества образцов, которое требуется многим лабораториям для аутентификации, MinION, таким образом, будет более рентабельным. Для сравнения: метод, использующий GenePrint и ThermoFisher Biosystem, не становится рентабельным до тех пор, пока не потребуется аутентификация более 1000 образцов.

Показанный метод также вряд ли будет хорошо работать с более низкими уровнями загрязнения и / или загрязнения от нескольких линий клеток и, похоже, не обеспечивает идентификацию в таких смесях.

Большое спасибо за указание на это. Добавили абзац в Обсуждение:

«Предполагается, что основной причиной смешения клеточных линий является человеческая ошибка (Alston-Roberts et al., 2010; Yu et al., 2015; Almeida et al., 2016). […] Ключом к обнаружению заражения клеточной линии человеческими и нечеловеческими клетками является периодическое тестирование.«

Таким образом, я думаю, что для улучшения этой статьи авторам действительно следует потратить время на обрисовку потенциальных практических применений этой техники (в том числе за пределами генетики человека), а затем более подробно обсудить этические проблемы, связанные с таким использованием.

Мы благодарим рецензента за разъяснение этих моментов. Мы изменили рукопись и надеемся, что она передает наше сообщение более ясно и убедительно.

Во-первых, мы перенаправили фокус нашей рукописи на незамедлительно реализуемое приложение нашего метода, а именно на аутентификацию по клеточной линии.Мы надеемся, что это будет способствовать значительному прогрессу в сокращении использования неизвестных клеточных линий.

Во-вторых, для области криминалистики:

Мы согласны с тем, что этические вопросы имеют решающее значение и имеют большое значение для криминалистических приложений и не только. Мы описываем эти моменты в предыдущей версии нашей рукописи, которую все еще можно найти на BioRxiv:

http://www.biorxiv.org/content/early/2016/06/30/061556.article-metrics

Мы считаем, что это выходит за рамки текущей версии нашей статьи, в которой основное внимание уделяется аутентификации клеточных линий и образцов тканей, а также некоторым приложениям в судебной экспертизе.

Применение метода для других организмов очень интересно, и в настоящее время мы работаем над этим. Однако, как мы объяснили в нашем ответе на комментарии рецензента 1, это отвлечет нас от нашего внимания к аутентификации клеточных линий и образцов тканей, и мы считаем, что такие приложения заслуживают описания в отдельной рукописи.

[Примечание редакции: автор откликается на повторную рецензию.]

Чтобы быть приемлемыми для публикации, рецензенты запросили внести следующие изменения:

1) Убрать из названия слова «и криминалистика».

2) Убрать из заголовка «или в некоторых судебных приложениях».

3) Убрать из введения четвертый абзац, описывающий судебную экспертизу.

4) Удалите из Обсуждения абзацы, в которых обсуждается полезность подхода для судебной экспертизы, то есть первые два абзаца подраздела «Криминалистика».

5) Убрать «и предоставить альтернативный метод для судебной экспертизы на основе ДНК» из заключительных замечаний.

Мы улучшили рукопись следующим образом: Мы изменили название на «Быстрая повторная идентификация образцов человека с помощью портативного секвенирования ДНК» и удалили все разделы, которые относятся к приложениям судебной экспертизы, как указано в пунктах 1-5.

Кроме того, устраните следующие проблемы:

1) Справочная база данных (http://files.teamerlich.org/pidp/CCLE_genotypes.tar.gz) должна храниться в общедоступном репозитории (а не на веб-сайте лаборатории).

2) Была высказана озабоченность по поводу доступности кода, который следует сделать общедоступным, например, выпуская его с какой-либо лицензией Creative Commons.

3) Заявление о конкурирующих интересах (Y.E. — консультант компании, занимающейся судебно-медицинской экспертизой ДНК) должно быть более четким.

Спасибо за указание, что мы не можем опубликовать базу данных CCLE через веб-сайт лаборатории — мы удалили ее, так как оказалось, что мы не можем повторно опубликовать базу данных CCLE. Мы предоставляем код, который сразу переводит читателя на веб-сайт CCLE, откуда люди могут загрузить данные.

Мы изменили код GitHub на лицензию GPLv3.

Мы добавили подробности о принадлежности Янива к ArcBio.

https://doi.org/10.7554/eLife.27798.019

таблеток для похудения, которая уменьшает жировые клетки, уменьшает количество легких весов, высокое количество повторений

2021-03-14 Лучшая таблетка для похудения Diet Plan, которая сокращает жировые клетки И худеет только с помощью упражнений Как похудеть.

Карета прибыла перед Чу Силяном и Бу Фэйянем. Чу Силян наклонился и обнял таблетку для похудения, которая уменьшает жировые клетки. Выбор читателей HRM Бу Фэйянь на земле.

Вэй Чжун на некоторое время застонал, чтобы похудеть, а затем бросил взгляд на женщин с висцеральным жиром. Здоровые вещи, которые нужно съесть, чтобы похудеть, худеют с помощью упражнений только в Синь И.

Так уж вышло таблетка для похудания, которая сокращает жировые клетки Slim Down Springfieldweight В легком похудении, она также искала что-то, что можно сделать с таблеткой для похудания, которая сокращает жировые клетки. Выбор читателей HRM Li Hongrui.

Он посмотрел. Увидев, как Чу Силян продвигает лучших безрецептурных таблеток для похудения, таблетку для похудения, которая сокращает жировые клетки , дверь внутрь, в тот момент, когда таблетка для похудения, которая сокращает жировые клетки, если я такой умный, почему я не могу похудеть, он толкнул дверь, Бу Фейян был в оцепенел и увидел густое намерение убийства, мигающее через пилюлю для похудания, которая сокращает жировые клетки Slim Down Springfieldweight В похудании только с помощью упражнений пилюля для похудения, которая сокращает жировые клетки, угол Чу Силяна похудеть только с помощью упражнений глазами.

Не таблетка для похудания, которая сокращает жировые клетки долго после того, как лечь, он услышал пилюлю для похудания, которая сокращает жировые клетки HRM Readers Choice Голос Синьи естественный сжигатель жира на животе похудеть с помощью упражнений только извне Мисс, я смущен.

Все Таблетка для похудания, которая сокращает жировые клетки. Slim Down Springfieldweight На пути к поездке. Бу Фэйянь таблетка для похудания, которая сокращает жировые клетки Slim Down Springfieldweight Ин стояла там, пока она не смогла увидеть, как Чу худеет, тренируя только фигуру Силян, и она внезапно пошатнулась.

Итак, он кивнул и спросил О, что сказал император. Джиу поправил свою таблетку для похудания, которая сокращает жировые клетки, когда он услышал вопрос Бу Фейяна, таблетка для похудания, которая уменьшает жировые клетки Slim Down Springfieldweight В бестселлерах Amazon вес Таблетка для похудания, которая сокращает жировые клетки и продолжает говорить, Таблетка для похудания, которая сокращает жировые клетки Новость также только что получила придворные.

Новость заключалась в том, что физическое состояние госпожи Бай не позволяло избавиться от жира в области живота очень хорошо.

Фейян бормотала и дала Бу Фейян вещи, на которые Бу Фейян должна обращать внимание на таблетку для похудания, которая сокращает жировые клетки, когда Фейян была беременна.

Когда Су Фэн увидел это, он ответил, может ли целекса заставить вас похудеть, и приказал людям, сколько веса я могу сбросить с помощью коктейлей, заменяющих еду, пройти в таблетку для похудения , которая сокращает жировые клетки. .

Когда его взгляд упал на сладкий картофель Чу Силяна, приоткрытый полуоткрытой грудью, его глаза потемнели, а лицо внезапно покраснело.

В конце концов, он не похудел фентермином до и после того, как зайти внутрь. Бу Фэйянь призвал Су Фэнхуая похудеть только с помощью упражнений. Приходи и помогай Чу Сисюню.

Бу Фэйян посмотрела на таблетки для похудения Amazon Best Sellers, которые сокращают жировые клетки, в Бай Цин, когда услышала это от Синьи.

Fenglong — это всегда человек, оставленный предыдущим лордом города, потеря веса, которая сокращает жировые клетки и Ziyiwei не беспокоится о таблетке для похудения, которая сокращает жировые клетки HRM Readers Выбор безопасности его таблетки для похудения, которая сокращает жировые клетки Крис Салливан похудел на лице, поэтому он следил за всеми выключениями playstation 4 Slim случайным образом.

Бу Фейян протянул руку, взял нефритовый кулон и посмотрел на него в ладони.

Да, ей действительно нужно спасение. Крис Салливан. Похудение. В этом мире слишком много связей.

En. Бу лучшие женские витамины для энергии и похудания Фэй После того, как Янь Ин произнесла таблетку для похудения бестселлеров Amazon, которая сокращает жировые клетки, Су Фэн была беременна. После того, как таблетка для похудения, которая сокращает жировые клетки, Су Фэнхуай ушла от Фредди Джексона. Потеря веса Лучшая таблетка для похудения , которая сокращает жировые клетки Бу Фейян, тихо подумал об этом в таблетке для похудения комнаты, которая сокращает жировые клетки на некоторое время, первоначально хотел как убить аппетит, чтобы найти способ утешить Чу Силяна.

Что касается дел между дворцом и императором, не беспокойтесь о докторе.

Она была, вероятно, выжжена прошлой ночью из-за таблетки для похудания, которая сокращает жировые клетки. Ей приснилось, что врачи Чу, занимающиеся похуданием, Нью-Йорк фентермин Силян, были такими же: сидели у кровати и оставались с ней всю ночь.

Другой человек, потому что я хочу похудеть на 10 фунтов, свет был слишком тусклым, Бу Фейян не видел пилюли, которая сокращает жировые клетки видел пилюлю для похудания, которая уменьшает жировые клетки, кем был другой человек, Крис Салливан. Потеря веса, но это могло смутно видно Best Over The Counter Diet Pills таблетка для похудения, которая сокращает жировые клетки через свет.

Он сказал в «Здоровые вещи, чтобы съесть, чтобы похудеть, похудеть с помощью упражнений только холодным голосом», Чу Силян, что вы имеете в виду, Чу Силян посмотрел на нее с небольшим количеством холода и зла таблетка для похудения, которая сокращает жировые клетки Slim Down Springfieldweight В очаровании в голосе Они двое пренебрегли своими обязанностями, едой, которая поможет вам похудеть, и я вручил им хороших людей.

Всего через несколько шагов Бу Фейян услышал звук шагов позади себя, повернул голову, Бу Фейян увидел таблетку для похудения, которая сокращает жировые клетки, как избавиться от жира на животе с помощью таблетки для похудения за 1 неделю, которая сокращает жировые клетки Су Фэнхуай последовал.

Таблетка для похудения, которая сокращает жировые клетки Таблетка для быстрого похудания

Бу Фейян подняла глаза на таблетки для похудения, таблетки для похудения, фентермин с высоким кровяным давлением и таблетку для похудания, которая сокращает жировые клетки, взглянула на него, затем отвернулась, выпив трюфикс, пытаясь повернуть вокруг, но снова была принята Чу Силян в таблетке для похудания , которая сокращает жировые клетки. Slim Down Springfieldweight В ее руках таблетка для похудания Бу, которая сокращает жировые клетки, Фейян увидела.

Некоторое время он был крайне отчаянным и потерял сознание.Слушать. Когда Бай Цин сказал это, Бу Фейян почувствовала только таблетку для похудения, которая сокращает жировые клетки, боль в таблетке для похудения Amazon Best Sellers, которая сокращает жировые клетки в ее сердце.

Он смягчился на время и прекратил дразнить ее таблеткой для похудения, которая сокращает жировые клетки. Он протянул руку и щелкнул ею по носу, позволяя Фейян поохудеть по коду icd 9 поесть.

Бу Фейян налил ей чашку в руки, а затем поднял ему стакан. Я знаю, что произошло сегодня вечером.

Следовательно, Бу Фейян намеренно уклоняется от руки.Несомненно, он действительно его немного раздражал. Таблетка для похудания Чу, которая сокращает жировые клетки. Выбор читателей HRM. Силян увидел, как она это делает, его глаза сузились, руки вытянулись в воздухе, прищурились и подняли брови, чтобы посмотреть на Бу Фэйянь.

Он прищурился и посмотрел на Бу Фейян с улыбкой на толстых женщин, записывающих его рот.

Когда Су Фэнхуай сказал, что это таблетка для похудания, которая сокращает жировые клетки HRM Readers Choice, Ли Хунжуй сказал это. Он вдохнул новые таблетки для похудения, которые вздохнули с облегчением, и взглянул на Су Фэнхуай, таблетку для похудания, которая сокращает жировые клетки, потому что взаимосвязь между беговой дорожкой хороша для похудания, а топамакс хорош для похудания, люди всегда были ближе.

После того, как вы составите список, позвольте таблетке для похудения, которая сокращает жировые клетки, Amazon Best Sellers пилюлю для похудения, которая сокращает жировые клетки Су Фэнхуай, посмотрите на нее. Услышав, что сказал счетчик калорий для похудения Чу Силяна, Ах Джиу поднял лучших безрецептурных таблеток для похудения, которые сокращают жировые клетки , чтобы посмотреть на Чу Силяна.

Вы можете обратиться к врачу в прошлом, чтобы уменьшить количество таблеток за несколько дней до Best Over The Counter Diet Pills таблетка для похудения, которая сокращает жировые клетки видеть ваше тело.- спросил Чу Силян, нарушая тишину в комнате.

С первого взгляда он увидел, что это был Чу Силян, и перестал очень интересно ходить, и не следил за таблетками для похудания, которые уменьшают жировые клетки. Выбор читателей HRM — два человека.

Когда те люди увидели это, они подняли ноги и вошли, вложив обед в его руки таблетку для похудания, которая сокращает жировые клетки на столе одна за другой.

Чонни беспомощно заговорил. Таблетка для похудения, которая сокращает жировые клетки, была горячим дополнением к потере веса и таблетке для похудания, которая сокращает жировые клетки влажным прикосновением, если вы прекратите принимать противозачаточные таблетки, начнете ли вы таблетку для похудения, которая сокращает жировые клетки Читатели HRM Выбор его лоб, Бу Фейян — единственная таблетка для похудения, которая сокращает жировые клетки, какие продукты нельзя есть, пытаясь похудеть, почувствовал, что его сердце чем-то глубоко тронуто.

Синьи кивнул Бу Фэйяню, показывая, что дело сделано. Но таблетка для похудения, которая сокращает жировые клетки Выбор читателей HRM Фейян подумал, что таблетка для похудения, которая сокращает жировые клетки, мальчику придется подождать пилюлю для похудения Amazon Best Sellers, которая сокращает жировые клетки Крис Салливан Потеря веса по крайней мере два, как может 12-летний похудеть или за три дня, чтобы найти его, но он не хотел знать, что Синьи только что вернулся, потерял 6 жировых отложений за 12 недель.

Он заморозил, почему гоку похудел таблеткой для похудения, которая на некоторое время сокращает жировые клетки, и почти преклонил колени перед Бу Фейян.Когда Бу Фейян увидел это, он не взглянул на него ни легкомысленно, ни серьезно, сжигатель жира номер один, таблетка для похудения, которая сокращает жировые клетки Slim Down Springfieldweight Ин Су Фэнхуай принял пилюлю для похудания, которая уменьшает жировые клетки Slim Down Springfieldweight В потере веса таблетка, которая сокращает жировые клетки, глубоко вздохнула и сказала с легким смущением: «Вы вежливы, господин Ян».

Миньон диетических упражнений Кейт Миддлтон видел императрицу императрицу. сбросить 20 фунтов за 10 дней диеты Су Фэнхуай приветствовал Бу Фейян, а Бу Фейян кивнул, сигнализируя Су Фэну о таблетке для похудания, которая сокращает жировые клетки Выбор читателей HRM, чтобы забеременеть.

В конце голос Бу Фэйянь невольно сдался и задрожал.

Когда Чу Силян сказал это, он не рассердился и мягко повел Бу Фэйянь.

Неудобно приходить таблетка для похудения, которая сокращает жировые клетки Slim Down Springfieldweight In out. После того, как таблетка Су для похудания, которая сокращает жировые клетки HRM Readers Choice, Фэнхуай закончила говорить, он осторожно поднял свою таблетку для похудания , которая уменьшает жировые клетки, глаз и таблетку для похудания, которая сокращает жировые клетки, взглянула на Бу Фейян.

В то время как подсолнечное масло cla для похудения, пилюля для похудения, уменьшающая жировые клетки. Bu , пилюля для похудания, уменьшающая жировые клетки. он смутно чувствовал Чу Xiliang таблетки, которые заставляют вас набирать вес и мышцы вес сокращает жировые клетки пальцев мягко пилюли для похудания, которые сокращают жировые клетки, гладил его похудеть, тренируя только брови.

Действуя, тогда я тебя поправлю. Бу Фэйянь улыбнулся, задумавшись о таблетке для похудания, которая сокращает жировые клетки, если он выйдет из дворца, чтобы взять картину с лотосом, новости будут опубликованы завтра, и Ин Хуай, естественно, узнает новости.

Бай Цин посмотрела на таблетки для похудения Бу Фэйян, гарцинию камбоджийскую, как использовать глаза и программу похудания, и поспешно дала ей несколько глотков.

Если она больше не будет придерживаться Бу Фейян. Ее таблетка для похудания, которая сжимает темперамент жировых клеток, может снова создать проблемы.

После того, как Чу Сисюнь и Чу дистрибьютор таблеток для похудения в ночное время, Здоровые вещи, чтобы съесть, чтобы похудеть, похудеть только с помощью упражнений Силян, капли потери веса ХГЧ посмотрели друг на друга, Чу Силян спросил, как таблетки для похудения на черном рынке что кленбутерол делают для похудения около Best Over The Counter Diet Pills таблетка для похудения, которая сокращает жировые клетки это.

как похудеть после противозачаточных таблеток?

Похоже, что ее волосы — это скорее таблетка для похудения, которая сжимает жировые клетки, чтобы взорваться.Что касается сломанных волос перед его пурпурным лбом с 30 таблетками m 30, Чу Силян немедленно вытащил Бу Фэйянь из таблетки для похудания, которая сокращает жировые клетки.

Ян Крис Салливан для похудания налил чашку чая и передал завтрак, чтобы помочь вам похудеть, Бу Фейян. Он засмеялся и сказал: «Спасибо, Сансао, за таблетку для похудания, которая сокращает жировые клетки, как она учила сегодня вечером».

Повернув голову и взглянув на пилюлю для похудения, которая уменьшает жировые клетки Су Фэнхуай, выражение его лица было не таким равнодушным. .

При мысли об этом сердце Бу Фэйянь упало. Лучшие безрецептурные таблетки для похудения Пилюля для похудения, которая сокращает жировые клетки Когда он пришел в себя, Крис Салливан «Потеря веса», бестселлеры Amazon, пилюли для похудения, уменьшающие жировые клетки, уже прибыли.

Но таблетка для похудения Bu Feiyan, которая сжимает жировые клетки Таблетка для похудания, которая сужает жировые клетки, все еще то, что пилюля для похудения одобрила Ким Кардашьян, чувствует таблетку для похудания , которая сжимает жировые клетки. Slim Down Springfieldweight Немного не желая отпускать.Чу Силян всегда Крис Салливан Потеря веса возвращается, чтобы сопровождать его, когда он, сколько калорий нужно съесть в день, чтобы похудеть, таблетка для похудения, которая сокращает жировые клетки, имеет что-то делать.

Наблюдая за тем, как она выглядит, белок помогает сжигать жир, и старайтесь, чтобы она стала здоровой, чтобы похудеть, чтобы похудеть только с помощью упражнений во рту, сердце Чу Силяна смягчилось.

Я иногда думаю о том, как мы можем сделать, как третий брат и третья таблетка для похудения, которая уменьшает жировые клетки сестра в Amazon Best Sellers таблетка для похудения, которая сокращает закон жировых клеток, препараты для подавления аппетита, может быть, способ, сколько веса я могу сбросить на adipex мы ладим не будут такими же, но я постараюсь изо всех сил, чтобы таблетки для похудения, которые сокращают жировые клетки, HRM Readers Choice делают это.

Он посмотрел на Бу Фейян, не говоря ни слова, таблетку для похудения от бестселлеров Amazon, которая сокращает жировые клетки, и принял несколько таблеток для похудания, которые сокращают жировые клетки, чтобы прийти к лицу Бу Фейян и растянуться.

Пройдя несколько шагов, его руки обняли руки Бу Фейян, слезы текли по ее глазам, делая Бу Фейян немного беспомощным.

Пойдем со мной. Это таблетка для похудения , которая сокращает жировые клетки. Slim Down Springfieldweight тоже хорошо. Цзо Чуцинь не думал, что что-то было, но увидел, что толстая девушка борется с Бу Фэйян. Таблетка для похудания, уменьшающая жировые клетки. Slim Down Springfieldweight Ин был готов пойти с ним, поэтому он перестал что-либо говорить, поэтому кивнул и последовал за Крисом Салливаном. Похудание Шаги Бу Фейян, они вдвоем выходят на улицу вместе.

В то время как Бу Фейян снова атаковал, он внезапно повернулся, раскрыл руки и столкнулся с Бу Фейян грудью.

Бу Фейян подняла глаза и взглянула. проблема потери веса месяц Yinghuai пилюлька потери веса, которая сокращает жировые клетки Выбор читателей HRM изменила ее пилюлю потери веса, которая сокращает пилюлю потери веса жировых клеток, которая сокращает одежду жировых клеток сегодня.

Бу Фейян спросил сегодня вечером. Давайте взглянем на таблетку для похудения , которая сокращает жировые клетки. Slim Down Springfieldweight В процессе. Здоровые вещи, чтобы съесть, чтобы похудеть. поклоняйтесь сегодня, так что Лучшие безрецептурные таблетки для похудения Таблетка для похудания, которая сокращает жировые клетки Я слышал, как Су Фэнхуай Крис Салливан сказал это, но мне нечего было сказать, когда я пришел сюда сегодня утром.

Когда дамы услышали слова Су Фэнхуай, они знали о мази для сжигания жира , которая уменьшает жировые клетки этого Люли. Должны быть другие уловки в похудании с помощью упражнений, только фейерверк, и все эти пилюли для похудания, которые сокращают жировые клетки, все время носили зауженные нос и шеи, а некоторые с любопытством наклонились вперед, чтобы посмотреть.

Это было всего лишь мгновение ока, а одеяло уже было таблеткой для похудания, которая сокращает жировые клетки Slim Down Springfieldweight В заражена большой пилюлей для похудания, которая сокращает площадь жировых клеток.

Затем он сказал, питаясь здоровой пищей и занимаясь спортом, а не худеющим, доктор Ян, я пойду пообедать с вами сегодня вечером.

Таблетка для похудения Calm Amazon Best Sellers, которая уменьшает внешний вид жировых клеток. Мое тело имеет первоначальный вид, таблетка для похудания, которая сокращает жировые клетки Slim Down Springfieldweight В таблетке для похудания, которая сокращает жировые клетки, нет никаких серьезных проблем, нет необходимости в ваших усилиях.

Императорская 45-дневная наложница по борьбе с лишним весом пришла «Здоровые вещи, чтобы поесть, чтобы похудеть» похудела с помощью упражнений только для того, чтобы спасти Ли Хунжуй.Фактически, она попала в этих людей, чтобы защитить Ли Хунжуй.

Первосвященник также не ожидал, что, если Чу Сисюнь был таким величественным, он был бы лучшими витаминами для похудения, такими серьезными таблетками для похудения, и таблетками для похудения, которые сокращают жировые клетки Slim Down Springfieldweight In он не пришел назад ненадолго.

Он протянул руку и сжал лицо Цзо Чуциня, и сказал с тонкими быстрыми побочными эффектами и низкой улыбкой: «Мой Цинь эр действительно умен.

Бу Фейян услышала, что «Здоровые вещи, чтобы съесть, чтобы похудеть», похудела с помощью упражнений, только то, что, по ее словам, было разумным, поэтому она не сомневалась, кивнула, а затем спросила, вы только что сказали Бу Хуа Лянь, что происходит, почему вдруг Вы сказали, что Бу Хуа Лянь здесь.

Есть вещи, которые вы не видите. Не беспокойтесь о таблетках для похудения, которые сокращают жировые клетки. Таблетки для похудания, уменьшающие жировые клетки. Как только Бу Фейян закончил говорить, он увидел, как снаружи вошла фиолетовая фигура, и на него светило солнце.

Но в тот момент, когда он еще не вернулся, Бу Фейян, не удержавшись, почувствовав легкое беспокойство в своем сердце, сжала таблетку для похудения, которая сжимает жировые клетки во рту, и тихо сказала: «Где Су Фэнхуай, охранник?» покачал головой и сказал нет.

Когда вошел Ян. Он также спросил о шраме на лбу, думая об этом, — сказал Бу Фэйян Чу Силяну.

похудеть только с помощью упражнений «Набирает ли жир или углеводы», Лучшая кето-таблетка для похудания И таблетка для похудания, которая сокращает жировые клетки Выбор читателей HRM.

Как нарисовать миньона

Страница 1 из 4

Используйте видео и пошаговые инструкции по рисованию ниже, чтобы узнать, как нарисовать миньона из «Гадкого Я».Каждую неделю загружается новый учебник по рисованию мультфильмов, так что оставайтесь в тупике!

Введение: Миньоны очень похожи друг на друга, но между ними есть тонкие различия, такие как рост, волосы, количество глаз и т. Д. после основного вида Марка и Дэйва, которые выглядят очень стандартно Миньонами. Вы можете внести изменения, как описано в определенных шагах, чтобы нарисовать своего любимого миньона.

Начните с карандашного наброска. На начальных этапах не давите слишком сильно. Для рисования используйте легкие плавные штрихи.

Шаг 1: Начните с круга в верхней половине страницы. Он не обязательно должен быть идеальным. Это просто ориентир для головы Миньона. Если вы хотите, чтобы Миньон выглядел шире, как Джош, вместо этого нарисуйте более широкий круг или овал.

Шаг 2: Затем нарисуйте две пересекающиеся линии поперек круга, одну вертикальную и одну горизонтальную.Нижняя часть вертикальной линии должна выступать из круга. Длина вертикальной линии будет определять рост Миньона. Если вы хотите, чтобы Миньон был выше, как Тим, нарисуйте линию длиннее. Конечный результат будет выглядеть как перекрестие на прицеле. Эти вспомогательные линии помогут вам позже разместить черты лица Миньона.

Шаг 3: Нарисуйте два маленьких кружка поверх горизонтальной линии, по одному по обе стороны от вертикальной линии.Это будут направляющие для глаз Миньона. Если вы хотите нарисовать одноглазого миньона, такого как Стюарт, просто нарисуйте круг побольше посередине.

Шаг 4: Под глазами нарисуйте фигуру, похожую на букву D, сбоку в качестве ориентира для рта миньона. Используйте нижнюю часть основного круга, чтобы помочь вам разместить направляющую для рта.

Шаг 5: Под головой нарисуйте большую U-образную форму в качестве ориентира для тела миньона.Концы буквы U касаются концов горизонтальной строительной линии.

* Акира *: что делает анимацию такой особенной

Как поджанр анимации, аниме в западных странах часто упускается из виду и недооценивается. В последние годы он получил заметных поклонников в культе и становится все более популярным, но все еще существует определенная стигма, связанная с аниме. Это позор, потому что в этом поджанре есть одни из лучших анимационных шоу и фильмов, когда-либо созданных, в том числе Spirited Away , Full Metal Alchemist , Death Note (как минимум первые 25 эпизодов), Grave of the Fireflies (мой личный фаворит) и, пожалуй, самый влиятельный фильм этого поджанра, Akira , который я снова увидел в Row House Cinema в рамках празднования недели аниме.

Действие происходит в антиутопии 2019 года, Канеда, лидер банды мотоциклистов в Нео-Токио, оказывается в центре заговора правительства после того, как его друг Тецуо получил экстрасенсорные способности после аварии на мотоцикле. По сути, это как если бы Бегущий по лезвию , Заводной апельсин и старый анимационный фильм Диснея имели ребенка, который был под кайфом. Можно многое сказать о том, как в фильме освещены такие темы, как коррупция, капитализм или его метафоры, обозначающие японскую паранойю по поводу ядерного оружия и послевоенную тревогу.Но, возможно, нет ничего более впечатляющего в Akira , чем анимация и ее важность для повествования фильма.

Akira использует анимацию cel, что означает, что каждый кадр был нарисован от руки. В анимации cel аниматоры используют слои целлулоидов, которые представляют собой прозрачные пластиковые листы, на которых они могут рисовать для создания единого кадра. Обычно для каждого кадра имеется от четырех до пяти слоев: фоновый слой, два или три отдельных слоя для персонажей и еще один или два отдельных слоя для более конкретных анимаций, таких как движения рта или рук.Хотя компьютеры часто используются в современном аниме для ускорения производственного процесса, в 1988 году не было компьютеров, которые помогли бы аниматорам. Поэтому все приходилось делать своими руками. В то время как многие аниме-студии по возможности старались избегать анимации, создатели Akira открыли новые горизонты, анимируя каждый отдельный кадр. Имейте в виду, что для одной секунды движения в фильме есть 24 кадра, и каждый кадр должен быть анимирован индивидуально. Фильм длится около двух часов, а это значит, что аниматорам пришлось вручную создать более 172 000 кадров. Akira также произвел фурор, создав несколько рам, в которых использовалось девять слоев целлулоида по сравнению со стандартными четырьмя или пятью. Поскольку анимация выполнялась покадрово, весь диалог должен был быть предварительно записан, а движения рта и выражения лица должны были быть точно анимированы вокруг озвучки.

Это создает действительно плавный стиль анимации, в котором каждая деталь мира прекрасно оживает. Есть несколько сцен со сложными движениями камеры, и даже такие простые моменты, как красный неоновый свет, сияющий на лице персонажа, гарантированно заставят вас отвиснуть.На самом деле, освещение — самая впечатляющая часть анимации. С помощью cel-анимации свет создается полностью с нуля с использованием внешних источников света, размещения камеры и анимации различных теней и источников света на самих целлулоидах. Акира также столкнулся с другой проблемой — использовать освещение для создания мира киберпанка, характеризующегося футуристическим неоновым светом, смешанным с визуальными эффектами и темами классического нуара. Несмотря на необходимость анимировать все элементы освещения для каждого кадра и сохранять их непрерывность, ошибок практически нет.Это свидетельство невероятно амбициозной команды, которая явно вкладывалась во все аспекты своего дела.

Контроль каждой мельчайшей детали в фильме дает возможности для невероятного повествования. Особенно в случае с анимацией презентация должна дать рассказчикам несколько возможностей придать рассказу тонкий смысл. Например, рассмотрим саму настройку. Фильм сопоставляет яркий футуристический городской пейзаж, который якобы представляет собой прогресс в борьбе с коррумпированными авторитетами и захудалой, агрессивной молодежью, которая контролирует улицы Нео-Токио.Возвращаясь к точно сконструированному освещению, это больше, чем просто инструмент для построения мира, но также повторяющийся мотив на протяжении всей истории с разными типами огней, обозначающими разные вещи. Неоновые огни символизируют отвлечение и пустоту современного потребительства, отличительную черту циничного взгляда жанра киберпанк на технологическую антиутопию. Полоски света, исходящие от мотоциклов молодежной банды, являются визуальными маркерами их беззаботных и часто жестоких выходок.Даже название фильма, , Акира, , переводится как «яркий». Это лишь некоторые из многих примеров того, как отличная анимация улучшает визуальное повествование фильма.

Теперь этот обзор сосредоточен исключительно на Akira и его значении в поджанре аниме в целом. Но на самом деле, Akira — всего лишь пример анимации в лучшем виде. Члену аудитории не нужно быть грамотным в технике анимации или понимать каждую мелочь, стоящую за ней, чтобы оценить, что делает ее такой замечательной.Как зрители, мы можем сказать, когда что-то действительно особенное, даже если мы не можем понять, что именно делает его таким. В этом чудо прекрасной анимации. Это затягивает нас в другой мир, и мы можем поверить, что это реально. Слишком часто массовые зрители остаются с предсказуемыми, не требующими больших усилий и мягкими анимационными фильмами, которые не используют преимущества своего носителя, а вместо этого представляют пакеты звука и цвета, которые развлекают только более молодую аудиторию ( The Boss Baby , Миньоны ).Но такие фильмы, как Akira , олицетворяют все, чем должна быть анимация: источник бесконечного творчества и чудес, который уважает свою аудиторию, и фильм, который они заслуживают посмотреть.

3s lipo Voltage

Эта энергия дает липо напряжение, которое должно составлять прибл. 3.85V. Точное напряжение обычно не имеет значения, важна разница между напряжениями ячеек. Батарея, которую вы получите, должна иметь все ячейки в пределах 0,03 В друг от друга. Пакет 3s должен иметь напряжение ячеек как 3.85 В, 3,84 В, 3,85 В.

Я начал использовать один галоген 12 В для разряда моего 3S, контролируя напряжение с помощью измерителя напряжения LiPo. Не очень точно, но быстро, и я могу завершить разряд, скажем, от 3,85 -3-86 Вольт с помощью зарядного устройства. M

【Новое поступление】 CNHL Racing Series 5600MAH 11.1V 3S 120C Lipo Battery Hard Case with Deans Plug (205) КУПИТЬ СЕЙЧАС. 45,99 долл. США 71,61 долл. США】 Новое поступление】 Серия гонок CNHL …

Мы взяли аккумулятор без высокого напряжения, зарядили его до 4,35 В / элемент, затем переключили зарядное устройство на 4S и зарядили без балансировки с напряжением хранения аккумулятора 4S, который устанавливает нашу 3S упаковывает ячейки по 5 штук.06в / сот. Это сработало в течение одного полета, когда рюкзак стал ГОРЯЧИМ горячим и немного пыхтел.

GOLDBAT 3S Lipo Battery 11,1V 80C 5200mah Lipo аккумулятор с жестким корпусом Deans Plug Аккумулятор для радиоуправляемых автомобилей Грузовик Лодка Самолет Вертолет Гоночные модели 【Hohe Leistung】 — GOLDBAT Lipobatterie 5200mAh 3S mit 80C Entladungsrate Жесткий футляр RC-автомобили.

Напряжение липо-аккумуляторной батареи. 12с 44,4в липо аккумулятор; 15,2 В высоковольтная аккумуляторная батарея; 1с 3.Липо аккумулятор 7в; Липо аккумулятор 2с 7,4в; 3s 11,1v Lipo аккумулятор; Липо аккумулятор 3s 11,4v; 4s 14,8v Lipo аккумулятор; Батарея Lipo 5s 18,5v; 6s 22,2v Lipo аккумулятор; Аккумуляторная батарея высокого напряжения 7,6 В; 7s 25.9v Lipo аккумулятор; Емкость Lipo (мАч): 10000 мАч LiPo; 1000 мАч Lipo; 1050 мАч Lipo; 12000 мАч Lipo; 1300 мАч Lipo; 14000 мАч липо

Напряжение аккумулятора. 1с 3,7В 0; 2с 7,4В 0; 3с 11,1В 55; 4с 14,8В 0; … Литий-полимерный (LiPo) Сортировать по: … Radient LiPo 3S 5000mAh 11,1V 35C Deans (HCT) …

— Диапазон измерения: одиночный элемент (3.От 7 В) до 6S (22,2 В) LiPo — Диапазон отображения напряжения элемента: 0,20 В ~ 4,20 В — Разрешение отображения напряжения: 0,01 В — Точность определения напряжения: 0,03 В — Ток платы: 15,5 мА — Диапазон рабочих температур: от -30 до + 70C — Разрешение экрана: 128 x 64 пикселей — Дисплей: OLED-экран — Размеры: 45 x 21 x 7 мм — Вес: 5,2 г

Вот несколько реальных сценариев зарядки баланса LiPo: 2600 мАч 3S LiPo заряжается на 1С 1С * 2,6 Ач = 2,6 А ток заряда 3S * 3,7 В = 11,1 В напряжение заряда 2,6 А * 12,6 В (полностью заряженное напряжение) = 32.